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强力霉素抑制鼠腰椎间盘退变的实验研究

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前言

1. 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 结论

5 附图

6 参考文献

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摘要

目的通过建立腰椎间盘退变动物模型,在强力霉素干预作用下,应用组织病理学观察及免疫组化方法检测退变椎间盘组织中MMP-2、MMP-3的表达,探讨该种药物抑制腰椎间盘退变的可行性及抑制效果,以期为临床应用强力霉素防治腰椎间盘退变提供理论依据。方法将36只雄性wistar大鼠随机平均地分为三组:正常对照组、模型对照组、药物干预组。将它们分笼饲养,并应用经腹膜手术,使用21 G针对模型对照组、药物干预组实验大鼠L3/4、L4/5椎间盘纤维环全层针刺进行造模。动物模型建立2周后开始药物干预,正常对照组、模型对照组不予以任何处理,药物干预组每日皮下注射强力霉素25mg/kg.d,持续2周。动物模型建立4周、8周时,每组随机选取6只动物,给予过量速眠新肌肉注射麻醉将其处死,迅速从腰椎后正中线切开皮肤,逐层分离腰椎两旁的肌肉韧带,直达椎体,取下实验大鼠整个腰椎段,用组织剪刀及镊子剥离椎间小关节和椎体前方的软组织,分别从L3椎体下缘和L4椎体上缘分离上、下软骨终板,取出L3/4椎间盘组织。用同样的方法取出L4/5椎间盘组织,行HE染色及免疫组化染色观察。结果术后4周和8周通过HE染色观察正常对照组腰椎间盘纤维环与髓核间有较宽的缓冲带,界线明显,髓核呈凝胶样外观;模型对照组4周时可以发现纤维环与髓核界线稍微模糊,但髓核仍然保持凝胶样外观,8周时可以看到腰椎间盘呈破絮状,有大量不定形物质,纤维环与髓核界线不能明确分清,髓核丧失凝胶样外观;药物干预组则可看到腰椎间盘纤维环与髓核间有相对于正常组窄的缓冲带。免疫组化染色观察正常对照组和药物干预组均有MMP-2、MMP-3表达,且无统计学差异性(P>0.05),而模型对照组MMP-2、3显著表达,与正常组和药物干预组有统计学差异(P<0.05)。结论强力霉素作为MMPs抑制剂可以抑制退变腰椎间盘中MMP-2及MMP-3的表达,为抑制和改善椎间盘间盘退变的发展起到了重要作用,具有潜在的、巨大的应用前景。

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