桥粒芯糖蛋白1（DSG1）在口腔粘膜白斑和口腔鳞癌中的表达

摘要

口腔白斑(oralleukoplakia，OLK)是指“是口腔黏膜上以白色为主的损害，不具有其他任何可定义的损害特征；一部分口腔白斑可转化为癌”。口腔粘膜上皮异常增生是口腔粘膜癌前病变的一个最基本特征，是上皮由正常状态向恶性转化的过渡阶段。由OLK向口腔鳞癌(oralsquamouscellcarcinoma，OSCC)的发展过程是多阶段、多步骤的。大量的研究表明其转变是一个受多因素影响的复杂过程。近来研究发现桥粒在肿瘤中的表达减少，尤其是在恶性肿瘤中基本不表达，桥粒在组织的恶变及肿瘤的转移中发挥了一定作用。本研究通过免疫组化技术检测口腔正常粘膜、口腔白斑、口腔鳞癌及体外培养的上皮细胞中桥粒芯糖蛋白1(desmogleinl，DSG1)的表达，以研究桥粒的变化规律，探讨其在癌变过程中的意义。 目的： 探讨桥粒在口腔粘膜癌变过程中的表达及意义，并且探讨口腔白斑癌变机制。 方法： 1.口腔正常上皮细胞体外培养，调节培养液中钙粒子浓度，免疫组化S-P法检测桥粒芯糖蛋白1(DSG1)的表达。口腔白斑成纤维细胞的培养：组织块法培养白斑成纤维细胞，绘制生长曲线，MTT法比较正常成纤维细胞与白斑成纤维细胞的生物学活力，免疫组化法检测角蛋白、波形蛋白表达。 2.口腔舌癌上皮细胞(Tca-8113)与口腔正常成纤维细胞、口腔白斑成纤维细胞在相同条件下混和培养3天，S-P法检测桥粒芯糖蛋白1(DSG1)的表达。 3.通过免疫组化S-P法检测来自山东大学口腔医院病理科1995-2002石蜡标本，包括正常口腔粘膜10例，OLK35例(其中单纯增生17例，轻度异常增生9例，中度异常增生6例，重度异常增生3例)，OSCC30例(其中Ⅰ级12例，Ⅱ级10例，Ⅲ级8例)中桥粒芯糖蛋白1(DSG1)的表达，并对免疫组化染色的OD值测量，进行统计学处理。 4.透射电镜观察桥粒在口腔癌变过程中的变化。 结果： 1.细胞培养：成功的培养了口腔粘膜正常上皮细胞及口腔白斑成纤维细胞。口腔白斑成纤维细胞生长速度、分裂增殖能力及存活能力均较正常成纤维细胞(normalfibroblast,NFS)明显增强(p＜0.05)。口腔白斑成纤维细胞的细胞角蛋白免疫组化染色呈阴性，波形蛋白染色呈阳性。 2.免疫组化结果：正常口腔黏膜中DSG1表达阳性率为100％；口腔白斑单纯增生组DSG1表达阳性率为94.1％；口腔白斑不典型增生组DSG1表达阳性率27.8％；口腔鳞癌组阳性率为13.3％。当钙离子浓度在1.0mM时体外培养的正常口腔粘膜上皮细胞呈阳性染色。当钙离子浓度在1.0mM时，Tca-8113细胞未见阳性表达，Tca-8113细胞与正常成纤维细胞混合培养组亦未见阳性表达，Tca-8113细胞与口腔白斑成纤维细胞混合培养组见阳性表达。 3.平均光密度(OD)：正常口腔粘膜组、单纯增生白斑组、不典型增生白斑组、口腔鳞癌组平均光密度依次减小，组间两两比较有显著差异性(p＜0.05)。口腔鳞癌中不同分化的癌组织中平均光密度值亦依次减小，组间两两比较有显著差异性(p＜0.05)。 4.电镜结果：正常口腔粘膜上皮中可见两细胞间有大量的桥粒连接，大量与桥粒连接的张力细丝排列整齐，胞核无明显变化。癌变口腔粘膜中桥粒结构被破坏，与桥粒连接的张力细丝收缩呈球状，排列紊乱，桥粒的正常结构被破坏，胞核呈蚕食状。 结论： 本研究发现桥粒在口腔白斑中表达减少，尤其在不典型增生白斑中，同样在口腔鳞癌中表达减少，而在低分化鳞癌中基本无表达。这提示桥粒在口腔癌变的发生发展过程中具有一定的意义，为临床上治疗和阻断白斑癌变提供新的思路。

目录

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材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

致谢

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