尖锐湿疣、鲍温样丘疹病、鲍温病及外阴鳞癌中HPV型与端粒酶活性的关系

摘要

本研究的目的是检测并比较正常包皮、尖锐湿疣(CA)、鲍温样丘疹病(BP)、鲍温病(BD)及外阴鳞状细胞癌(SCC)皮损中人类端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白的表达，同时检测CA及BP皮损中人类乳头瘤病毒(HPV)类型，探讨：1.端粒酶在正常组织、良性增殖性疾病及恶性肿瘤中的表达情况及其临床意义，2.HPV类型对端粒酶活性的影响及高危型HPV可能的致癌机理。 方法 1.收集本院皮肤科及病理科近5年保存的经病理确诊的40例CA、30例BP、16例BD及16例SCC的完整蜡块，另取门诊手术室环切的16例正常包皮进行甲醛固定与石蜡包埋，以此作为正常对照。 2.以表皮中hTERT蛋白的表达代表端粒酶的活性，采用免疫组化方法检测其表达。 3.比较正常包皮、CA、BP、BD及SCC之间hTERT的表达情况。 4.以HPV16、18代表高危型HPV，采用聚合酶链反应(PCR)方法检测CA和BP皮损中HPV16、18感染的情况。 5.比较CA和BP病例中HPV16、18阳性组与阴性组之间以及二者与正常对照组之间hTERT的表达情况。 结果 1.各组免疫组化染色位置及着色强度结果：光镜下，阳性着色主要位于细胞核或细胞浆，部分位于细胞膜。16例正常包皮均为阴性；尖锐湿疣中，阳性细胞主要为空泡细胞，数量较少，阳性颗粒较淡；鲍温样丘疹病和鲍温病中，阳性细胞数目增多，染色增强，棘层和基底层内均有较多阳性细胞，且主要为核异形细胞，后者较前者阳性细胞百分比更高，染色更强；鳞状细胞癌中，阳性细胞比例高，呈散在或灶状分布，阳性颗粒染色深。 2.各组hTERT表达的阳性率结果：正常对照组、CA组、BP组、BD组及SCC组分别为0％、32.5％、53.3％、62.5％、87.5％。 3.各组hTERT表达的阳性强度比较结果：正常对照组与其余各组比较，差异均显著；CA组与BP组、BD组及SCC组比较，均有显著性差异；BP组与BD组之间无显著差异，BD组与SCC组之间无显著差异，但BP组与SCC组之间差异显著。 4.CA和BP皮损中HPV16、18检测结果：40例CA中7例HPV16阳性，占17.5％，30例BP中HPV16阳性例数为14例，占46.7％，所有病例均未扩增出HPV18。 5.CA与BP病例中HPV16阳性组与阴性组之间以及分别与正常对照组之间hTERT表达强度比较结果：所有CA与BP病例中，HPV16阳性组较阴性组表达强度高，有显著差异；CA内部HPV16阳性组较阴性组表达强度高，差异显著；BP内部HPV16阳性组较阴性组表达强度高，亦有显著差异；以上各组均比正常对照组表达强度高，差异均显著。 6.HPV16阳性及阴性的BP与HPV16阳性的CA之间hTERT表达强度比较结果：BP中HPV16阳性组与CA中HPV16阳性组之间比较，前者较后者表达强度高，差异显著；BP中HPV16阴性组与CA中HPV16阳性组之间比较，无显著差异。 结论 1.端粒酶在正常组织、良性增殖性疾病及恶性肿瘤中的表达强度呈梯度升高，提示端粒酶激活在细胞增生及永生化中均发挥重要作用。如何以端粒酶活性的高低来确定良恶性肿瘤的界限尚需进一步研究。 2.鲍温样丘疹病的端粒酶活性较尖锐湿疣高，但比鳞状细胞癌低，提示其介于皮肤鳞状细胞良恶性肿瘤之间，虽然未达到恶性肿瘤的程度，但有一定恶性发展趋势。临床上应对其密切观察，长期随访。 3.BP中高危型HPV感染率较高，CA中则相对较低，且二者均主要以HPV16感染为主。 4.CA和BP病例中HPV16阳性组与HPV16阴性组相比，前者端粒酶活性均较后者高，二者又均比正常对照组高，提示高危型HPV能更强地激活端粒酶，使受感染细胞端粒酶活性升高可能是其导致恶性肿瘤发生的早期事件之一。 5.同为HPV16感染，BP较CAhTERT表达水平高；HPV16阳性的CA与HPV16阴性的BP比较，其hTERT表达无显著统计学差异。这提示，除HPV16感染外，尚有其它因素参与BP的发病，这一因素亦促进了端粒酶的表达，从而使BP和CA呈现出不同的临床病理表现。

目录

原创性声明及关于学位论文使用授权的声明

摘要

符号说明

前 言

第一部分免疫组化方法检测正常包皮、尖锐湿疣、鲍湿样丘疹病、鲍湿病及外阴鳞癌皮损中hTERT的表达

第二部分PCR法检测尖锐湿疣与鲍湿样丘疹病组织中感染的人类乳头瘤病毒类型

附 图

参考文献

致 谢

攻读学位期间发表的论文