单个CD8T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义的研究

摘要

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 目的：建立一种新的单细胞内IFN-γ的检测方法-毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法(CEIA-LIF)。 材料与方法：选2例重型再障(SeverAplasticAnemia，SAA)患者及1例正常人，用Ficoll淋巴细胞分离液及免疫磁珠法，分离纯化外周血CD8+T细胞。将其与毛地黄皂苷反应15min，再与FITC-抗IFN-γ单抗(mAb)反应20min。用CEIA-LIF法进行单个细胞的连续检测，并用倒置显微镜及激光扫描共聚焦荧光显微镜等证实本法的可行性。 结果：纯化的CD8+T细胞内的IFN-γ，是在不溶膜的情况下得到全部检测。2例SAA患者外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的含量，分别为(151.53±28.92)zmol和(223.72+45.23)zmol，高出正常对照(47.47±17.97)zmol约3～4倍，(p＜0.01)。 结论：CEIA-LIF法对单个CD8+T细胞内含量的测定是可行的，有望用于临床检测。 第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 目的：分析单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义。材料与方法：选14例SAA，3例T-ALL，2例B-ALL，5例AML，11例CLL及5例正常人，用Ficoll淋巴细胞分离液及免疫磁珠法，分离纯化外周血CD8+T细胞。将其与毛地黄皂苷反应15min，再与FITC-抗IFN-γ单抗(mAb)反应20min。用CEIA-LIF法进行单个细胞的连续检测。 结果：①5例正常人单个CD8+T细胞内IFN-γ的平均含量为47.47±20.16zmol，从我们的资料看，男女之间无显著差异(P＞0.05)，且与年龄没有明显相关性(r=0.121)；②14例SAA在治疗前单个CD8+T细胞内IFN-γ的平均含量为139.79±21.59zmol，明显高于正常对照组(P＜0.01)，而且年轻患者的IFN-γ水平似乎高于年龄较高的患者，但没有明显的统计学意义；免疫治疗有效者(CR/PR)治疗前、后IFN-γ水平出现了显著的下降，而无效者(NR)似乎并没有显著的变化；而且预后随治疗前IFN-γ水平的变化而不同；③10例急性白血病患者中，治疗前T-ALL患者单个CD8+T细胞内的IFN-γ水平比B-ALL和AML要低，差异显著(P＜0.05)，而且三者均低于正常水平(P＜0.01)；治疗前、治疗后1～2月及治疗后6～12月的单个CD8+T细胞内IFN-γ的平均水平也有显著性差异(P＜0.05)；另外，治疗前单个CD8+T细胞内IFN-γ水平与年龄尚缺乏大样本的统计学意义；④11例慢性淋巴细胞白血病患者，单个CD8+T细胞内IFN-γ的平均含量为97.18±42.19zmol，而且较早阶段的患者IFN-γ水平明显低于较晚阶段的患者(P＜0.01)。 结论：①正常人单个CD8+T细胞内IFN-γ的平均含量为47.47±20.16zmol，与性别和年龄似乎没有相关性。②SAA在治疗前单个CD8+T细胞内IFN-γ的平均含量为139.79±21.59zmol,年轻患者的IFN-γ水平并没有明显高于年龄较高的患者。③免疫治疗对大部分SAA有效，而且对预后有一定的预示作用。④急性淋巴细胞白血病患者单个CD8+T细胞内的IFN-γ水平低于正常人，治疗后出现了明显升高。⑤T-ALL和B-ALL患者的发病年龄与IFN-γ水平可能有关。⑥慢性淋巴细胞白血病患者单个CD8+T细胞内IFN-γ的平均含量为116.62+21.73zmol，且与临床分期(Binet/Rai)有关，较晚期的病例比早期病例IFN-γ水平要高；IFN-γ水平有可能成为判断预后以及制订治疗策略的重要指标。⑦单个CD8+T细胞内IFN-γ的水平对于鉴别重型再生障碍性贫血及急性增生低下型白血病有意义。

目录

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缩略语

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 中文摘要

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 英文摘要

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 前言

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 材料和方法

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 结果

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 讨论

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 结论

第一部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定 参考文献

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 中文摘要

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 英文摘要

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 前言

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 材料和方法

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 结果

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 讨论

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 结论

第二部分 单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定在血液系统疾病中的意义 参考文献

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