IGF-1诱导神经干细胞向少突胶质细胞系分化及其移植治疗脊髓损伤的实验研究

摘要

目的：用悬浮克隆培养技术，在体外从新生大鼠的海马分离神经干细胞，并进行扩增传代培养，观察其增殖、迁移及多潜能分化特性，为下一步试验打下基础。 方法：解剖显微镜下取新生大鼠海马组织，0.125％的胰蛋白酶溶液消化后，分别以4×10<'4>/ml、4×10<'5>/Inl和4×10<'6>/ml三种密度接种于25cm<'2>培养瓶中悬浮培养，2—3天半量换液，6-7天后传代。将培养的神经干细胞球接种在放入24孔内板涂有多聚赖氨酸的玻璃盖片上，在不同培养基条件下观察其贴壁后的迁移、增殖和分化。应用抗Nestin、抗MAP2、抗MBP和抗GFAP进行细胞化学染色鉴定。 结果：自新生大鼠海马组织培养获得的细胞培养后形成的细胞球为Nestin阳性，能够耐受多次体外传代。10<'4>/ml这一接种密度由于细胞量少，发生细胞重聚的可能性降低，有利于干细胞的克隆形成。这些细胞接种后贴壁培养可以分化为MAP2阳性的神经元、MBP阳性少突胶质细胞及GFAP阳性星形胶质细胞。神经干细胞球贴壁后在含有Bfgf及IGF-1培养基内分化，细胞迁移的距离明显较不完全及含小牛血清的培养基条件下远。 结论：1、自新生大鼠海马组织培养获得的细胞球能够自我复制，具有多种分化潜能，即可以分化为神经元、少突胶质细胞及星形细胞，并能够耐受多次体外传代，具有神经干细胞的特点。 2、Bfgf及IGF1可以促进贴壁培养的神经干细胞的迁移。 3、本实验获得的神经干细胞细胞可以体外大量增殖，能够满足下一步试验的需要。

目录

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前言

论文1新生大鼠海马源性神经干细胞的体外分离培养、迁移与分化研究摘要

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论文3重物撞击大鼠脊髓挫伤模型的建立及运动功能评估摘要

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论文4IGF-1诱导后的神经祖细胞移植对大鼠脊髓挫伤功能改善和组织修复作用的研究摘要

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缩略语索引

致谢

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