落射荧光显微术高通量分析单细胞中的酯酶

摘要

本论文用落射荧光显微术对单细胞分析进行了一些研究。共分三章：第一章落射荧光显微术检测胃癌细胞中的酯酶。第二章．落射荧光显微术高通量检测单个胃癌细胞中的酯酶。第三章．高通量微流控芯片分析单个胃癌细胞中的酯酶。 第一章我们采用落射荧光显微术对胃癌细胞提取液中酯酶的活性进行了鉴定。在这部分实验中是以FDA作为底物，FDA这种物质可以通过细胞膜自由地渗透到细胞里面去，在细胞内酯酶的催化作用下发生反应产生一种新的物质，这种物质在激光的激发下会产生荧光，我们通过分析这种生成物质的荧光强度来实现对酯酶的测定。我们首先对实验的最佳条件进行研究，包括采用底物FDA的浓度、缓冲溶液的pH、FDA在酯酶作用下反应的时间与生成物质荧光强度之间的关系等。最终通过标准曲线法进行定量。 第二章我们用落射荧光显微术高通量检测单个胃癌细胞中的酯酶，研究了一种高通量检测细胞的方法。我们将细胞在灭菌之后的反应池中贴壁以后，加入FDA溶液进行孵育。FDA会自由地渗透到细胞里面去，在细胞内酯酶的作用下产生一种物质。我们通过分析这种物质的荧光强度来检测细胞内的酯酶。在这部分实验中我们对底物的浓度、反应时间等进行了研究。根据标准曲线法对单个细胞中的酯酶活性进行了高通量测定。 第三章我们用微流控芯片通过落射荧光显微镜对细胞中的酯酶进行了高通量分析。在这部分实验中，我们自己制作了微流控芯片，芯片通道采用PDMS膜制成，然后将膜封接到盖玻片上。以FDA作为细胞中酯酶的底物，我们利用这种简易微流控芯片对由酯酶引起反应产生荧光信号的细胞进行了高通量分析。

目录

文摘

英文文摘

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前言

第一章落射荧光显微术检测胃癌细胞中的酯酶

第二章落射荧光显微术高通量检测单个胃癌细胞中的酯酶

第三章高通量微流控芯片分析单个胃癌细胞中的酯酶

致谢