难治性癫痫患者外周血多药耐药基因（MDR1）表达的研究

摘要

本文研究了人多药耐药基因(multidrugresistance，MDR1)的mRNA及其产物P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)在人外周血中量的表达，探讨其作为难治性癫痫(refractoryepilepsy，RE)诊冶外周指标的可行性，并比较两种检测方法的特异性及灵敏性。 方法：选取难治性癫痫患者、癫痫控制良好患者和健康献血者各30例为研究对象，采用流式细胞仪定量检测人外周血中MDR1基因编码产物P-gp的表达；荧光定量PCR方法检测MDR1基因mRNA的表达量。 结果：1流式细胞仪检测P-gp：难治性癫痫组P-gp阳性细胞百分率为11.9±5.57﹪，癫痫控制良好组P-gp阳性细胞百分率为0.83±0.58﹪，正常对照组P-gp阳性细胞百分率为0.57±0.57﹪。经统计学分析，难治性癫痫组与癫痫控制良好组比较P-gp阳性细胞百分率有显著性差异(t=10.86,P＜0.01)；难治性癫痫组与正常对照组比较P-gp阳性细胞百分率有显著性差异(t=4.09,P＜0.01)，癫痫控制良好组与正常对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。2荧光定量PCR检测MDR1基因mRNA：发现难治性癫痫组的mRNA表达量在1.5×106±2.0×106copies/ml，癫痫控制良好组则为7.1×104±9.4×104copies/ml，而正常对照组为1.9×104±2.2×104copies/ml。经统计学分析，难治性癫痫组与癫痫控制良好组比较MDR1-mRNA的表达量有显著性差异(t=11.12,P＜0.01)；难治性癫痫组与正常对照组比较MDR1-mRNA的表达量有显著性差异(t=4.1,P＜0.01)，癫痫控制良好组与正常对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。3两种检测方法的比较：在流式细胞仪的检测中，难治性癫痫组P-gp阳性细胞表达率为93﹪，癫痫控制良好组P-gp阳性细胞表达率为93﹪，正常对照组表达率为80﹪，而在荧光定量PCR方法检测中所有病例均检测到MDR1-mRNA的表达，如按＞105为参考值，则阳性率为100﹪。 结论：定量检测癫痫患者外周血中MDR1的表达水平，同步反应了患者脑组织内MDR1的表达水平，可作为难治性癫痫诊冶的外周指标。适时定量检测外周血MDR1的表达水平对了解难治性癫痫的发生发展机制、生物学行为和预后，以及指导临床诊治均具有重要的意义，可提供一个新的思路。在检测方法学上，荧光定量PCR较流式细胞式检测灵敏度及特异性均高。

目录

原创性声明及关于学位论文使用授权的声明

符号说明

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附表

综述 难治性癫痫P-糖蛋白耐药机制的研究进展

致谢

攻读硕士期间完成的题目