体外模拟的二氧化碳气腹环境对卵巢癌SKOV3凋亡、侵袭能力影响的实验研究

摘要

腹腔镜手术与传统的开腹手术比较，具有手术效果好、术后患者疼痛少、康复快等优点，目前已逐步成为治疗良性妇科疾病的重要术式。随着腔镜技术的发展，腹腔镜在妇科恶性肿瘤中的应用(如早期卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌等的手术)也逐渐开展并越来越受到关注。腹腔镜技术用于恶性肿瘤手术后，手术安全性，特别是术后出现穿刺点种植和腹腔肿瘤转移、播散，这一问题已引起人们广泛关注，并为此进行深入研究。有研究表明，与开腹组比较，CO<,2>气腹作用下裸鼠腹壁切口转移瘤频发、瘤体更大，腹腔内脏器肿瘤种植、播散情况更严重。CO<,2>气腹对肿瘤细胞生长可能有潜在促进作用<'[1]>。但也有相反的报道，如Canis等<[2]>运用非免疫缺陷鼠的肿瘤模型对CO<,2>气腹的研究，发现开腹组肿瘤生长更大，但腹腔肿瘤播散却是气腹组更严重。CO<,2>引起肿瘤复发及转移的机制亦众说纷纭，分别从酸中毒、免疫损伤、机械物理损伤等方面阐述。目前关于转移因子、黏附分子的分子生物学研究国内外鲜有报道。 目的：探讨二氧化碳(CO<,2>)气腹对卵巢癌细胞株SKOV3抗凋亡因子XIAP和PED/PEA-15表达的影响，进一步探讨CO<,2>气腹环境对SKOV3细胞凋亡能力的影响，为CO<,2>气腹腹腔镜手术在卵巢癌中应用的安全性作出评价。 方法：建立体外模拟CO<,2>气腹环境，将人卵巢癌细胞株SKOV3分别暴露于不同压力(8～12mmHg)的CO<,2>环境中，持续1h、2h、3h后，脱离CO<,2>环境，放入常规CO<,2>培养箱(37℃，5﹪CO<,2>)中培养，分别于培养24h、48h、72h；这期间作为对照组的SKOV3细胞一直放于常规培养箱中。采用实时荧光定量PCR法及免疫细胞化学法检测各组SKOV3细胞XIAP、PED/PEA-15 mRNA和蛋白的表达。应用统计学方法对所得数据进行分析。 结果：SKOV3细胞置于不同的CO<,2>气腹环境后，与对照组比较：SKOV3细胞XIAP、PED/PEA-15的表达明显增加(P值均<0.05)，并且与CO<,2>压力和作用时间有关。(1)不同CO<,2>压力、作用时间及培养时间下XIAP、PED/PEA-15 mRNA表达量均显著高于对照组(P<0.01)，且CO<,2>压力、作用时间之间存在正交互作用(P<0.01)。在CO<,2>作用时间和培养时间相同时随CO<,2>压力增大，XIAP、PED/PEA-15 mRNA增多，10mmHg时达峰值，12mmHg时开始下降，平均表达量低于8mmHg(P<0.01)；在相同的CO：压力和培养时间下，随CO<,2>环境作用时间延长，XIAP mRNA的表达量在前两个小时平均值无差异性，作用时间为3小时较前两小时增多，而PED/PEA-15 mRNA的表达量逐渐增多，2h达到高峰，随后逐渐下降。(2)析因设计方差分析结果显示不同的CO<,2>压力、作用时间以及培养时间之间的XIAP、PED/PEA-15蛋白表达量均有显著性差异(P<0.05)，具体变化规律与mRNA表达相一致，并且CO<,2>压力、作用时间之间存在正交互作用(P<0.01)，其它因素互相间无交互作用(P值均>0.05)，以上各组与对照组比较均有显著差异性(P<0.01)。 结论：CO<,2>气腹环境可促进SKOV3细胞中抗凋亡因子XIAP、PED/PEA-15表达增加，从而抑制细胞凋亡，促进肿瘤生长。 意义：XIAP、PED/PEA-15的变化与CO<,2>作用压力及时间密切相关，提示我们在临床上可控制气腹机压力及手术时间，并可从凋亡分子的水平上积极干预以避免 CO<,2>气腹的不良作用，进而推广腹腔镜在恶性肿瘤中的应用。

目录

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符号说明

前 言

第一章 二氧化碳对卵巢癌细胞株SKOV3抗凋亡因子XIAP和PED/PEA-15表达的影响

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图表

第二章 体外模拟的二氧化碳气腹环境对卵巢癌细胞黏附、侵袭能力的影响

引 言

材料与方法

结果

讨 论

结 论

附图表

参考文献

致 谢

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