蒙药材库页悬钩子木的活性成分研究—乙酸乙酯层和正丁醇层的活性成分研究

摘要

研究目的:1.研究库页悬钩子木（Rubus sachalinensis Leveille）的细胞毒活性、抗细菌活性、镇痛、抗炎生物活性;2.对具有抗菌、抗炎生物活性的乙酸乙酯层和正丁醇层提取物进行分离、纯化并通过1H-NMR、13C-NMR、MS及化学方法结构鉴定，寻找自然界新化合物或有活性的单体化合物，扩充天然产物库;3.为该药有效物质基础研究和质量控制研究等提供科学依据。
　　 实验方法:取库页悬钩子(R.sachalinensis)干燥茎枝，粉碎，用95％乙醇回流提取一次，用75％乙醇回流提取3次，分别3h，2h，2h，浓缩醇溶液，得到粗提物浸膏。粗提物浸膏加水悬浮，依次用等体积石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，减压回收溶剂。所剩水层浓缩后上聚酰胺色谱柱，依次用水、乙醇-水(1∶1)、95％乙醇洗脱，减压回收溶剂。得到不同极性提取物，用细胞毒活性试验、抗细菌活性试验、抗炎试验、镇痛试验测定各提取物的生物活性，选取活性部位，用柱色谱、薄层色谱、高效液相色谱法等进一步分离提纯，得到化合物单体。通过光谱解析等手段确定化合物平面结构和立体构型，然后按活性追踪结果参考化合物结构类型分组测定其抗炎，抗菌活性。对活性较好的新的单体化合物进行新药开发研究。
　　 结果:对库页悬钩子木（R.sachalinensis）的地上部分的活性成分乙酸乙酯和正丁醇层萃取物进行了系统的化学成分研究，从中分离并鉴定了31个化合物，其中有四个为新化合物，并通过1H-NMR、13C-NMR、MS及化学方法鉴定了它们的结构。包括12个三萜类及其苷类成分:F1-F12;8个黄酮及其苷类成分:F20-F27;6个酚酸类化合物:F13-15.F17-F19;4个木脂素类成分:F28-F31;1个倍半萜类化合物:F16。结构如下:2α，3β，19α-三羟基-齐墩果-12-烯-24-醛基-28-CO2-吡喃葡萄糖苷(1)、2α，3α，19α-三羟基-乌苏-12-烯-24-醛基-28-CO2-吡喃葡萄糖苷(2)、2α，3β，19α-三羟基-乌苏-12-烯-24-醛基-28-CO2-吡喃葡萄糖苷(3)、2α，3β，19α-三羟基-乌苏-12-烯-24-羧基-28-CO2-吡喃葡萄糖苷(4)、2α，3β，19α-三羟基-乌苏-12-烯-23-醛基-28-CO2-吡喃葡萄糖苷(5)、2α，3β，19α，24-四羟基-乌苏-12-烯-28-CO2-吡喃葡萄糖苷(6)、2α，3β，19α-三羟基-乌苏-12-烯-28-CO2-吡喃葡萄糖苷(7)、2α，3β，19α-三羟基-乌苏-12-烯-28-酸(8)、2α，3β，19α-三羟基-乌苏-12-烯-24-醛基-28-酸(9)、蔷薇酸(Euscaphicacid)(10)、2α，19α-二羟基2-酮-乌苏-12-烯-28-酸(11)、3α，19α-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸(12)、没食子酸(13)、咖啡酸(14)、没食子酸乙酯(17)、对羟基苯乙酸(18)、槲皮素(20)、山奈酚(21)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖(22)、槲皮素-3-O-α-L-葡萄糖（23*）、椴树苷(24)、顺式椴树苷(25)、1，2，3-没食子酰基-α-D-葡萄糖(30)、1，2，3-没食子酰基-β-D-葡萄糖(31)。
　　 结论:本课题是对蒙药材库页悬钩子木（R.sachalinensis）的活性部位乙酸乙酯层和正丁醇层萃取物的化学成分进行了系统的研究。其中4(F23F26F28F29)个为新化合物;13个(F1、F2、F3、F4、F6、F7、F9、F10、F11、F12、F27、F30、F31)为首次从该植物中得到。因此，不但有助于确定蒙药材悬钩子木（R.sachalinensis）的生物活性成分及其分离分析测定方法，指导蒙药材及其制剂质量标准的制定和制剂工艺研究，并有助于对其功效主治的现代生物医学阐释和有利于扩充天然产物库。