三种疾病同输卵管中β-防御素基因表达和血液内雌、孕激素水平的相关性研究

摘要

本实验建立了RT-qPCR方法检测HBD-1、HBD-2和β-actin三个基因的方法，并通过此方法测定早期子宫内膜癌、子宫肌瘤和异位妊娠下输卵管组织中HBD-1和HBD-2基因mRNA相对表达量:此外，将病例血液样本送交实习医院化验科并测定样本血液中雌孕激素水平。
　　实验结果显示:在早期子宫内膜癌、子宫肌瘤和异位妊娠患者输卵管组织中HBD-1基因mRNA表达量明显高于HBD-2基因mRNA表达量，具有极显著差异(P＜0.01)或显著性差异(0.01＜P＜0.05)。在早期子宫内膜癌组中，HBD-1的表达量约为HBD-2表达量的50倍，极显著差异(P＜0.01);在子宫肌瘤组中，HBD-1的表达量约为HBD-2表达量的5倍，显著性差异(0.01＜P＜0.05);在异位妊娠组中，HBD-1的表达量约为HBD-2表达量的16.5倍，极显著差异(P＜0.01)。子宫肌瘤和异位妊娠患者的输卵管组织中HBD-1、HBD-2基因mRNA表达量都高于早期子宫内膜癌患者输卵管组织中HBD-1基因mRNA表达水平(P＜0.01)，而子宫肌瘤和异位妊娠患者的输卵管组织中HBD-1、HBD-2基因mRNA表达量没有显著差异(P＞0.05)。此外，子宫肌瘤和异位妊娠患者血液雌激素浓度分别同早期子宫内膜癌下患者血液雌激素浓度相比显著性升高(0.01＜P＜0.05)，而子宫肌瘤和异位妊娠下患者血液雌激素浓度没有显著差异(P＞0.05);异位妊娠患者血液孕激素浓度显著性高于早期子宫内膜癌患者和子宫肌瘤患者血液孕激素浓度(0.01＜P＜0.05)，但早期子宫内膜癌与子宫肌瘤下患者血液孕激素浓度没有显著差异(P＞0.05)。
　　上述结果可得出结论，当输卵管组织中HBD-1mRNA表达量极显著高于HBD-2mRNA表达量(P＜0.01)，但雌孕激素水平并没有显著性升高时，预示患者可能为早期子宫内膜癌;当输卵管组织中HBD-1mRNA表达量显著高于HBD-2mRNA表达量(0.01＜P＜0.05)，且雌激素水平显著性升高时，但孕激素没有显著性升高时，预示患者可能为子宫肌瘤;当输卵管组织中HBD-1mRNA表达量极显著高于HBD-2mRNA表达量(P＜0.01)，且雌孕激素水平显著性升高时，预示患者可能为异位妊娠。这为今后临床快速诊断和区分三种重要女性生殖道疾病提供了一定的实践和理论依据。

目录

摘要

1 引言

1．1 防御素在人体内分布

1．2 β-防御素的发现、分布、分子特征、基因结构

1．2．1 β-防御素的发现、分布

1．2．2 β-防御素分子特征

1．2．3 β-防御素基因结构分析

1．3 人女性生殖道内β-防御素

1．3．1 女性生殖道内人β-防御素存在位置

1．3．2 人β-防御在生殖道中存在的意义与作用

1．3．3 生殖道内β-防御素的调控

1．4 三种女性生殖系统疾病

1．4．1 子宫内膜癌

1．4．2 子宫肌癌

1．4．3 异位妊娠

1．5 雌激素和孕激素

1．6 此次研究的目的及意义

2 材料和方法

2．1 实验材料

2．1．1 实验中用到组织的获得

2．1．2 药品与试剂

2．1．3 仪器设备

2．2 实验方法

2．2．1 PCR引物的设计与合成

2．2．2 组织材料总RNA的提取

2．2．3 RT-PCR反应及产物的克隆测序

2．2．4 RT-PCP像检测输卵管组织中HBD-1和HBD-2基因mRNA表达量

2．2．5 测定患者血液内雌激孕激素浓度

2．3 数据统计分析

3 实验的结果与分析

3．1 实验取材组织中的总RNA提取

3．2 HBD-1、HBD-2和β-actin基因RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳

3．3 HBD-1、HBD-2和β-actin序列分析结果

3．4 qPCR检测HBD-1、HBD-2和B-actin扩增效率和熔解峰结果

3．5 三种疾病下HBD-1和HBD-2基因表达q-PCR检测结果

3．5．1 HBD-1和HBD-2基因在早期子宫内膜癌输卵管组织中的表达差异结果

3．5．2 子宫肌瘤输卵管组织中HBD-1和HBD-2基因的表达差异结果

3．5．3 异位妊娠输卵管组织中HBD-1和HBD-2基因的表达差异结果

3．5．4 三种疾病下卵管组织中HBD-1基因的表达差异结果

3．5．5 三种疾病下卵管组织中HBD-2基因的表达差异结果

3．5．6 三种疾病下患者血液内雌孕激素表达水平的差异结果

4 讨论

5 结论

参考文献

致谢

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