大连长山岛玫瑰（Rosa rugosa Thunb.）种群的遗传多样性和遗传结构的初步研究

摘要

玫瑰(RoSa rugosa Thunb．)是国家二级保护植物，是蔷薇科观赏植物天然的种质资源，具有重要的经济和生态学价值。由于人类活动对环境的破坏，使大连长山岛原有的大片玫瑰种群片断化，使其遗传多样性和遗传结构受到严重影响。本文以大连长山岛的玫瑰种群为研究对象，选取了17个)A(CSDl～CSD17)，148株样品，用RAPD标记对种群遗传多样性和遗传结构进行分析，并讨论了该种群受威胁的原因，提出了相应保护对策。 本文通过14个随机引物共扩增到162个显性位点，其中多态位点148个，4个位点表现出丛的特异性：丛内多态位点百分比(P)的平均值为22.59﹪，平均每个位点的有效等位基因数(Ne)为1.1387，丛内Nei’s基因多样性指数(H)为0.0803，这在以克隆繁殖为主的植物中是比较低的。种群内多态位点百分比(P)达91.36﹪，基因多样性指数(H)为0.2690，Shanon信息指数(I)是0.4412，这说明大连上山岛玫瑰种群具有比较高的遗传多样性。丛大小与丛内多态位点百分比(P)、Shannon信息指数(I)，呈显著正相关。仅在一个丛检测到基因型完全相同的植株。 对种群遗传结构和遗传分化的研究结果表明，各位点在丛间基因分化度(C<,ST>)的波动范围是0.014～0.9743，在各位点分化程度差别很大，平均值为0.6954：丛间基因流(Nm)波动范围为0.0000～34.9826，平均值为0.2190，远小于1，说明丛间基因交流较小，遗传漂变较大。 由遗传一致度和遗传距离的无偏差统计表明，在17个丛中，最小的遗传距离是0.1006，在丛CSD4和CSD5之间；最大的遗传距离是0.3803，在丛CSD3和CSD16之间；Mental检测表明遗传距离与空间距离呈明显正相关。由哈一温平衡检验结果分析，占总位点数的80.25﹪，说明有80.25﹪的位点严重偏离随机交配。 与其它地区种群相比，大连长山岛野生玫瑰种群分布范围较大，生境相对较好，遗传多样性水平高，但在部分海岸线也存在生境的破坏及退化，导致玫瑰分布区片断化，种群规模减少，进而可能会导致在遗传漂变的作用下使其遗传多样性逐渐丧失。建议对其采取适当的就地措施，规划保护区，保护海岸植被与生境，促进种群恢复，并辅以人工保育以加大丛间的基因流。

目录

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缩略语表

摘要

1.前言：

1.1遗传多样性研究进展

1.1.1遗传多样性的概念、基本理论

1.1.2遗传多样性研究的方法和技术

1.1.3珍稀濒危物种的遗传多样性研究及其保护现状

1.2玫瑰的生物学及生态学特征

1.2.1玫瑰的分类学地位

1.2.2玫瑰的生物学特性

1.2.3玫瑰的分布和生态学特征

1.2.4玫瑰的种质、经济及生态价值

1.3玫瑰的种群生物学研究进展

1.3.1玫瑰的种群和群落生态

1.3.2玫瑰的种群遗传学研究进展

1.3.3玫瑰种群受威胁的现状

1.3.4玫瑰种群及其遗传多样性保护中的关键问题

1.4本研究的目的和意义

2.大连长山岛野生玫瑰分布区概况：

2.1取样地区的地理位置及自然概况

2.2各个取样点的地理位置与相对分布

3.材料和方法

3.1研究对象的层次和取样尺度

3.2样本总DNA的提取

3.2.1样本基因组DNA

3.2.2 DNA浓度和纯度的确定

3.3野生玫瑰RAPD反应体系的建立

3.3.1 RAPD反应体系的组分

3.3.2 RAPD反应程序：

3.3.3引物的筛选

3.3.4 PCR产物的检测与谱带记录

3.4 RAPD数据分析

4.结果与分析

4.1 RAPD显性频率

4.2丛内克隆多样性

4.3丛内与种群内遗传多样性

4.3.1丛内与种群内遗传多样性各项指标

4.3.2丛大小对其遗传多样性的影响

4.4丛间即种群的遗传分化

4.4.1 RAPD位点的分化

4.4.2丛间遗传一致度(I)和遗传距离(D)

4.4.3聚类分析和主成分分析

4.4.4卡方检验

4.5与其它样地的遗传各项指标的比较

5.讨论

5.1种群的遗传多样性

5.2空间隔离下玫瑰的种群结构

5.3对哈-温平衡的严重偏离

5.4大连长山岛玫瑰种群的遗传多样性受威胁的程度和原因

5.5大连长山岛玫瑰遗传多样性的保护策略

5.6本文的创新点和不足

5.6.1本文的主要创新点

5.6.2本文的不足

6.小结

附表

图版

参考文献：

致谢