冻融后移植的小鼠卵巢组织对促性腺激素的反应

摘要

目的：探讨冻融后移植的小鼠卵巢组织对促性腺激素的反应。 方法：将36只性成熟雌性小白鼠用随机数字表法分为卵巢组织新鲜移植组、冻融移植组和对照组，每组12只。新鲜移植组小鼠切除双侧卵巢，将卵巢切成小组织块，每侧卵巢平均切成3块，每块的体积约为1mm×2mm×2mm大小，卵巢组织用生理盐水冲洗干净后立即移植入小鼠双侧肾被膜下，每侧肾脏植入3块；冻融移植组小鼠切除双侧卵巢，将每侧卵巢平均切成3块，生理盐水冲洗干净后采用玻璃化冷冻方法冷冻保存，2周后将冷冻卵巢组织复苏，移植入小鼠双侧肾被膜下。卵巢组织移植2周后新鲜移植组和冻融移植组，每组用随机数字表法取6只小鼠应用7.5IU人绝经期促性腺激素及10IU人绒毛膜促性腺激素。通过动物术后阴道脱落细胞学检查、移植卵巢组织光镜观察，比较卵泡形态，计数各级卵泡数目，反映种植后卵巢组织存活、卵泡生长发育及对促性腺激素的反应等情况。同时应用免疫组织化学染色方法观察各组卵泡中卵泡刺激素受体的表达情况，高倍镜下新鲜移植组、冻融移植组和对照组各组分别随机取20个窦状卵泡和20个窦前卵泡，显微摄像头在相同条件下采集图像，采用Image-Pro Plus5.0图像分析软件进行图像分析，得到积分吸光度值来反映每组卵泡中卵泡刺激素受体的表达情况。 结果：新鲜移植组、冻融移植组和对照组未应用促性腺激素小鼠卵巢组织内近成熟卵泡百分率分别为2.3％、2.3％和2.6％，应用促性腺激素小鼠卵巢组织内近成熟卵泡百分率分别为4.2％、4.0％和5.8％，各组内分别比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；新鲜移植组和冻融移植组与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。新鲜移植组、冻融移植组和对照组卵泡刺激素受体表达积分吸光度值在窦状卵泡中分别为9408±2777、9175±3093和8838±2064，在窦前卵泡中分别为4531±1903、4809±1386和5516±1136，各组间分别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论：1.卵巢组织冷冻保存、复苏及移植过程未影响卵巢卵泡刺激素受体的表达；2.冻融后移植的小鼠卵巢组织对外源性促性腺激素的反应未受冷冻、复苏及移植等过程影响；3.肾被膜下异位移植的小鼠卵巢组织对外源性促性腺激素的刺激有正常反应。

目录

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前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

综述 卵巢组织冻存移植研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文