肝组织内HBVcccDNA含量与肝细胞癌临床和病理的关系

摘要

【目的】 原发性肝细胞癌(HCC)是目前世界上发病率最高的恶性肿瘤之一。流行病学早已证实乙肝病毒(HBV)的感染是HCC发生的独立危险因素。共价闭合环状DNA(cccDNA)是乙肝病毒生命周期中的一种重要的复制中间体，已经被公认为乙肝病毒持续感染和肝脏进行性病理改变的根本原因。许多的体外试验、动物试验研究均提示HBVcccDNA与肝细胞癌变的发生密切相关，而人肝癌组织内HBVcccDNA与肝细胞癌发生的关系及其临床研究，国内报道较少。 应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的方法检测HCC患者癌组织、非癌组织两种手术标本中的HBVcccDNA定量水平、总HBVDNA定量水平，同时结合肝实质损害程度相关指标及癌组织病理分级，探讨HBVcccDNA在原发性肝癌发生发展中的作用以及和癌组织病理分级、肝实质损害程度的关系，为临床上原发性肝细胞癌的预防和治疗提供理论根据。 【方法】 45例HCC患者均为山东省立医院肝病中心2006年12月～2007年5月期间就诊的患者，男36例，女9例。42例为血清HBsAg阳性，3例为血清HBsAg阴性(2例血清HBeAb和HBcAb均阳性，1例血清HBcAb阳性)，所有患者血清抗HCV均阴性。患者均未进行过抗病毒治疗。原发性肝细胞癌诊断均经组织病理证实。癌组织和非癌组织均取自于手术切除标本，手术切缘处无癌细胞残留。标本采集后，一部分进行癌组织病理分级；另一部分应用Roche light-cycle荧光PCR检测仪检测两种组织内HBVcccDNA和总HBVDNA定量水平；全自动生化分析仪检测肝实质损害程度相关指标(ALT、TBIL等指标)。进行统计分析。 【结果】 1、所有肝组织内均检测到HBVDNA和HBVcccDNA的存在。其中42例HBsAg阳性患者的癌组织HBVcccDNA定量为3.22×101copies/mg～4.51×104copies/mg(对数值为3.09+1.22)；总HBVDNA定量值为1.67×102copies/mg～6.43×105copies/mg(对数值为4.33±1.11)。非癌组织HBVcccDNA定量为1.17×101copies/mg～5.95～104copies/mg(对数值为2.62±0.97)；总HBVDNA定量值为1.42×102copies/mg～1.26×106copies/mg(对数值为4.13±1.09)。 2、血清HBsAg阳性患者的癌组织较非癌组织总HBVDNA定量水平差别无显著性(4.33±1.11对4.13±1.09，P=0.439)，而癌组织HBVcccDNA定量水平较非癌组织显著升高(3.09±1.22对2.62±0.97，P=0.039)。 3、血清HBsAg阳性患者的癌组织中HBVcccDNA占总HBVDNA的比例显著升高(70.09％对62.33％，P=0.015)。42例HBsAg阳性患者中有14例(14/42，33％)的癌组织HBVcacDNA几乎成为HBVDNA唯一存在形式。(见表1)4、癌组织和非癌组织的HBVcccDNA定量和总HBVDNA定量均呈高度正相关(分别为r=0.8244，P<0.001；r=0.8460，P<0.001)。 5、3例血清HBsAg阴性患者的肝组织内均检测到了HBVcccDNA的存在，且HBVcccDNA比例均较高，其中一组cccDNA比例高达99.52％。(见表2)6、癌组织中HBVcccDNA定量水平和癌组织的病理分级无相关性(P>0.05)。(见表3)7、癌组织和非癌组织的HBVcccDNA定量与肝实质损害指标血清谷丙转胺酶(ALT)、总胆红素(TBIL)凝血酶原时间(PT)均无相关性(P>0.05)。 【结论】 1、癌组织内HBVaccDNA占总HBVDNA的比例较非癌组织显著增高。 2、部分血清HBsAg、HBVDNA均阴性，HBcAb阳性的HCC患者检测到组织内HBVDNA的存在，且HBVcccDNA几乎成为病毒DNA的唯一存在形式。 3、癌组织HBVaccDNA定量水平较对应的非癌组织显著增高，而总HBVDNA定量水平之间差别无显著性。 4、癌组织HBVcccDNA水平与癌组织的病理分级及肝实质损害程度无相关性。癌组织HBVcccDNA水平不能作为HCC恶性程度的预测指标。

目录

论文说明：符号说明

声明

前 言

材料和方法

结 果

讨 论

结 论

附图表

参考文献

文献综述1HBVcccDNA的检测及其与肝细胞癌的关系

文献综述2：乙肝病毒的非规范复制循环以及产物特点

致 谢

攻读学位期间发表的论文