胃癌新的诊断标记和治疗靶位的研究

摘要

胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，中国是胃癌的高发国家，其致死率位居全球肿瘤相关致死率第二位。由于缺乏可靠的早期诊断标志，胃癌的预后很差。因此，揭示胃癌的发病机理，寻找有效的肿瘤标记和药物靶点成为当务之急。有鉴于此，本论文主要研究了端粒酶逆转录酶(hTERT)，CIP2A和JMJD2B在胃癌中的表达状况，以及它们在胃癌诊断和治疗中的潜在价值。 由全长hTERT转录子介导的端粒酶的活化是肿瘤细胞恶性转化的重要过程。端粒酶活性和hTERT的表达被认为是人类许多恶性肿瘤包括胃癌在内的有效的诊断和预后标记。在本实验中我们比较了37例胃癌和正常胃粘膜中hTERT的表达情况。在37例肿瘤组织中有33例(90％)检测到全部hTERT mRNA的表达，正常胃粘膜中有23例(62％)有不同水平的hTERT mRNA的表达。37例标本中有25例(71％)表达全长hTERT mRNA转录体，我们意外的发现37例正常胃粘膜中仍有16例(43％)检测到全长hTERT mRNA的表达。免疫组化的结果显示在大部分胃癌组织和一部分正常胃上皮细胞中可以检测到hTERT的蛋白表达。这一发现提示hTERT不适宜作为一种有效的鉴别胃癌和正常组织的分子标记。 CIP2A是新发现的一种致癌因子，可以稳定c-myc蛋白的表达，促使细胞发生恶性转化。我们的研究发现37例胃癌标本中34例(90％)有CIP2A mRNA的表达，而相对应的37例正常胃粘膜中有26例(70％)不表达CIP2A mRNA。总共有32例(87％)的胃癌组织中高表达CIP2A。免疫组化结果显示胃癌中检测到CIP2A的蛋白表达，而大部分相应正常胃粘膜中检测不到CIP2A的蛋白表达。敲除CIP2A后明显抑制了肿瘤细胞的生长和克隆形成能力，并且该抑制作用不依赖于p53和pRB信号通路。胃癌细胞系AGS中抑制CIP2A的表达后可以诱发细胞衰老。而且敲除CIP2A还可以触发白血病细胞HL60的部分分化。CIP2A通过抑制细胞生长停滞，衰老或分化使肿瘤细胞获得持续增殖能力，因此CIP2A可能作为胃癌的诊断标志或者治疗靶点。 JMJD2B是一种组蛋白脱甲基酶，通过影响染色体的结构重组来调节基因的转录。我们初步的实验结果发现敲除JMJD2B的表达明显抑制了包括AGS，HGC-27，和BGC-823在内的多个胃癌细胞系的细胞克隆形成能力，该抑制作用通过依赖p53和不依赖p53两种机制实现。这一发现提示我们JNJD2B可能作为一种新的抗癌治疗的靶点。综上所述，我们的研究发现(i)hTERT不适宜作为一种有效的鉴别胃癌和正常组织的分子标记；(ii)CIP2A则很有希望成为新的胃癌的诊断标记和治疗靶位；(iii)JMJD2B可能作为一种新的胃癌治疗靶点。

目录

论文说明：符号说明

声明

前言

第一部分胃癌及正常胃组织中全长端粒酶逆转录酶(hTERT)转录子的表达

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

5.小结

第二部分CIP2A在胃癌中高表达并且抑制CIP2A的表达可以导致肿瘤细胞克隆形成能力的降低，细胞发生衰老或者分化

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

5.小结

第三部分：JMJD2B作为新的抗肿瘤治疗靶点的生物学研究

1.实验材料

2.实验方法

3.初步实验结果

4.讨论

5.小结

论文总结与结论

参考文献

致谢

博士期间发表论文情况

发表论文一

发表论文二

博士期间参加国际会议情况