结直肠癌患者外周血单个核细胞HLA-A和HLA-B mRNA的表达及其临床意义

摘要

目的:研究结直肠肿瘤患者外周血单个核细胞HLA（human leukocyte antigen，HLA）-A和HLA-B mRNA的表达情况，初步探讨外周血单个核细胞在宿主细胞免疫中的作用，以及HLA-A和HLA-B在监测肿瘤发生、发展中的临床意义。 方法:为了避开HLA-Ⅰ的多态性，我们针对其外显子中的保守区，用Primer Premier5．0软件设计HLA-A和HLA-B特异性引物，比对没有其他序列同源。以Beta-actin为内参照，实时荧光定量RT-PCR方法检测结直肠肿瘤患者（结直肠肿瘤组，n=50）、结直肠良性病变患者（良性病变组，n=35）和健康体检者（正常对照组，n=42）外周血单个核细胞HLA-A mRNA和HLA-B mRNA的表达，并比较结直肠肿瘤不同TNM分期中HLA-A mRNA和HLA-B mRNA的表达。结直肠肿瘤组和良性病变组所有患者均经病理确诊。三组平均年龄相近。用Rest（relative expression software tool）软件计算相对表达率（Ratio）。化学发光方法检测三组对象中血清癌胚抗原（CEA）、癌相关抗原（CA）19-9和CA242水平。用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）分析HLA-A mRNA、HLA-B mRNA在结直肠肿瘤检测中的初步应用。 结果: 1．外周血单个核细胞HLA-A和HLA-B mRNA的相对表达率。 正常对照组PBMC的HLA-A和HLA-B mRNA相对表达率分别为0．99±0．47，1．13±0．6；结直肠良性病变组相对表达率分别为0．76±0．59，0．84±0．57；结直肠肿瘤组分别为0．38±0．31和0．39±0．35。结直肠肿瘤组HLA-A和HLA-B mRNA相对表达率低于正常对照组和结直肠良性病变组（P<0．001）。 2．结直肠肿瘤不同TNM分期HLA-A和HLA-B mRNA的表达。 结直肠肿瘤组外周血单个核细胞HLA-A mRNA在TNMⅠ～Ⅳ期相对表达率分别为0．48±0．32，0．64±0．75，0．56±0．41，0．61±0．34。HLA-B mRNA在TNMⅠ～Ⅳ期相对表达率分别为1．28±0．29，0．47±0．35，0．58±0．40，0．46±0．25。结直肠肿瘤组外周血单个核细胞HLA-A mRNA在TNM不同分期之间的表达无统计学差异（P>0．05）。结直肠肿瘤组外周血单个核细胞HLA-B mRNA在TNMⅠ期患者中的表达高于Ⅱ期和Ⅳ期（P<0．05），在其他不同分期之间差异无统计学意义（P>0．05）。 3．PBMC的HLA-A和HLA-B mRNA在结直肠肿瘤检测中的初步应用。 外周血单个核细胞表达的HLA-A和HLA-B mRNA监测结直肠肿瘤的敏感性分别为84．4％和70．2％。 结论： 1．本实验是首次研究结直肠肿瘤患者外周血单个核细胞HLA-A mRNA和HLA-B mRNA的表达水平，实验发现结直肠肿瘤患者外周血单个核细胞HLA-A mRNA和HLA-B mRNA的表达水平低于结直肠良性病变组和正常对照组。 2．结直肠肿瘤患者外周血单个核细胞HLA-A mRNA和HLA-B mRNA有望发展成为一个新的结直肠肿瘤诊断指标，为肿瘤诊断提供了新视野。

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讨 论

参考文献

文献综述：主要组织相容性复合物与肿瘤的免疫逃逸

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攻读硕士期间发表的论文