蒙药“伊赫-汤”对酒精导致斑马鱼胚胎肝损伤的修复

摘要

酒精是导致肝脏损伤的第二大因素，仅次于肝炎病毒。蒙药“伊赫-汤”是在临床上使用的治疗酒精性肝病的主要复方药。本试验先以斑马鱼作为动物模型，建造酒精性肝损伤的疾病模型，再使用“伊赫-汤”进行治疗，评价“伊赫-汤”对酒精性肝损伤的修复效果。 试验选用AB系斑马鱼作为动物模型，通过授精后4–24小时(hpf)酒精染毒建造斑马鱼酒精性肝损伤模型。使用死亡率、孵化率、心囊浮肿面积进行评价非特异性酒精性肝损伤评价，同时使用肝脏荧光面积、细胞凋亡和氧化应激相关基因进行评价酒精性肝损伤评价。造模成功后利用蒙药“伊赫-汤”在48 hpf对酒精性肝脏损伤进行治疗，并记录后续指标。在72 hpf ，与对照组相比20 mg/mL酒精组的存活率下降到50%(p<0.05)，而酒精染毒后“伊赫-汤”治疗组的存活率上升到73.3%(p<0.05)。在96 hpf，与对照组相比10和20mg/mL酒精组心囊面积显著大于对照组(p<0.05)，而通过“伊赫-汤”处理后，酒精引起的心囊浮肿面积与对照组无显著差异。在96 hpf，与对照组相比10和20mg/mL酒精染毒组斑马鱼胚胎肝荧光面积显著小于对照组和蒙药单独处理组(p<0.05)，而通过“伊赫-汤”处理后，酒精引起的荧光肝脏面积与酒精单独染毒相比，差异显著(p<0.05)，而与对照组无显著差异。同时10和20 mg/mL 酒精组fabp10a基因表达与对照组相比，表达量下调显著，而酒精染毒后“伊赫-汤”治疗组fabp10a表达量与酒精组比较有显著升高，但未恢复到正常水平。酒精组引起细胞凋亡关基因bax, bcl-2和氧化应激相关基因nrf2, keap1a, keap1b表达下调，而“伊赫-汤”治疗组与酒精组比较有显著升高。 实验结果表明，“伊赫-汤”可以对斑马鱼胚胎进行造模，“伊赫-汤”对酒精导致的斑马鱼胚胎的肝损伤以及死亡率、孵化率、心囊浮肿面积等非特异性毒性都具有明显的修复作用。

目录

缩 略 语 表

1文献综述

1.1肝损伤

1.2氧化应激反应

1.3蒙药“伊赫-汤”

1.4模式动物—斑马鱼

1.5研究目的及意义

2材料与方法

2.1 试验材料

2.2 试验方法

2.3数据统计与分析

3.1酒精对斑马鱼胚胎死亡率影响

3.2 “伊赫-汤”对斑马鱼胚胎死亡率影响

3.3蒙药“伊赫-汤”对酒精导致斑马鱼胚胎肝损伤的修复

3.4酒精对斑马鱼肝脏的影响

3.5肝脏病理基因的表达情况

4讨论

4.1酒精诱导肝损伤中的氧化应激反应

4.2“伊赫-汤”的作用机理

4.3“伊赫-汤”开发的新思路

5.结论

参考文献

致谢

作 者 简 介

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