转化生长因子-β与移植后淋巴组织增生性疾病关系的实验研究

摘要

目的：移植后淋巴组织增生性疾病十分少见，是发生在实体器官移植或骨髓移植后，包括反应性浆细胞增生到恶性淋巴瘤的一组疾病。它是免疫缺陷性淋巴组织增殖性疾病大类中的一种，与正常人群发生的淋巴组织增殖性疾病相比，在形态、临床行为和治疗预后有很大的差别。随着器官移植技术的迅速发展，PTLD的发病率也随之增多。国外对此类疾病已有较深入地研究，但国内对此类疾病的报道较少，至今仅有一些个例报道。本论文旨在SCID小鼠体内建立移植后淋巴组织增生性疾病（PTLD）的动物模型，并对成模率进行初步研究，在此基础上拟探讨转化生长因子—β（TGF—β）与移植后淋巴组织增生性疾病（PTLD）发病的关系，可为探索移植后淋巴增生性疾病的发病机制和提高临床诊疗水平提供重要的研究平台。 方法：本论文通过SCID小鼠来模拟器官移植后大量应用免疫抑制剂所造成的免疫缺陷（或免疫抑制）环境，通过人源性的EB病毒来模拟EB病毒感染环境，通过抗TGF—β单克隆抗体和PBS的比较来探索TGF—β和PTLD发病的关系。联合免疫缺陷动物（SCID小鼠）经腹腔注射EB病毒（EBV）阳性的志愿者外周血淋巴细胞（huPBL），通过IgG测定来确定人类免疫细胞在小鼠体内的重建，当小鼠濒死或死亡后解剖并取出其肿瘤组织，再通过组织病理切片和免疫组化分析来确定淋巴增生性疾病（LPD）的产生及其细胞来源，从而形成PTLD的动物模型。经过分析挑选出LPD发病时间短发病率高的志愿者血样，再重复上述实验过程，形成另一批PTLD模型。再将其分为处理组（注射抗TGF—β单克隆抗体）和对照组（注射PBS缓冲液），进行生存分析和LPD检测。 结果：移植志愿者huPBL后8周和12周SCID小鼠血清中人IgG含量分别达到（750．0±13．2）μg/mL和（1050．0±14．6）μg/mL。濒死或死后，组织病理切片显示为伴有高度有丝分裂率的大细胞淋巴瘤，肿瘤CD20阳性，LMP—1阳性。各志愿者外周血淋巴细胞在小鼠体所内产生的LPD存在一定程度不均一性，在40名志愿者中，10例在8周后产生LPD（25％），SCID小鼠的中位成瘤率为100％；8例在10—16周出现LPD（20％），中位成瘤率为55％；其他22例在16周后仍无LPD产生（55％）。在挑选出的志愿者外周血所重新建立起的EBV（+）huPBL—SCID模型中，处理组和对照组之间存在生存时间的差异（t=35．78，P<0．05），LPD成瘤率的不同（P=—0．003<0．01）以及肿瘤组织中T、B淋巴细胞水平面的差别，而且这些差异具有统计学意义。 结论： 1 SCID小鼠腹腔注射EB病毒阳性的人类外周血白细胞可建立移植后淋巴组织增生性疾病（PTLD）的动物模型。 2 SCID小鼠活体实验表明TGF—β可以影响PTLD的发病，这种影响与TGF—β自身特性有关。

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前言

材料与方法

实验结果

讨 论

综述：移植后淋巴组织增生性疾病研究最新进展

附 图

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的论文和著作