脐血Th17相关细胞因子水平与婴儿期感染性疾病的关系的相关性研究

摘要

研究目的：
　　 感染性疾病是儿童时期尤其是婴儿期最常见的疾病，严重者危及患儿生命。低出生体重儿、早产儿、男婴等患有该类疾病的风险较大，尽管存在这些危险因素，然而有些儿童更频繁地患有感染性疾病，因此推测婴儿先天性免疫系统的发育状态及其对适应性免疫系统发育的影响可能影响随后感染性疾病的发生和发展。
　　 据我们所知，先天性免疫在新生儿期占主导地位，细胞因子的调节网络在先天性免疫和适应性免疫之间起重要的纽带作用。
　　 Th17细胞是新近研究发现的一群主要分泌IL-17的辅助性T细胞，研究发现该细胞是一群重要的介导炎症反应的细胞，其分泌的细胞因子在炎症、自身免疫性疾病、肿瘤等疾病的发病过程中起了重要作用。近年来研究证明IL-17等Th17相关细胞因子参与适应性抗感染免疫反应的过程，而关于Th17相关细胞因子在先天性免疫中的地位及其对适应性免疫发育的影响机制尚不清楚。
　　 迄今为止，我们对于出生时Th17细胞相关细胞因子水平与婴儿期感染性疾病的关系知之甚少。本研究的目的是通过检测新生儿脐带血单个核细胞(CBMC)分泌的Th17相关细胞因子(IL-17、IL-23)水平与婴儿期感染性疾病的关系，探讨Th17相关细胞因子在早期感染免疫中的地位及其作用机制，以期发现能够预测机体早期免疫功能的客观指标，为临床预防及治疗儿童感染性疾病提供更加有益的思路。
　　 研究方法：
　　 1.实验对象选择标准:正常足月新生儿174例，母亲妊娠期身体健康，分娩前未使用过药物，生后母乳喂养为主。
　　 2.标本的采集及处理:新生儿出生断脐后即刻取母体端脐静脉血（4℃冰箱保存），加入淋巴细胞分离液，利用密度梯度离心法对CBMC进行分离并制备细胞悬液，然后加入PHA(10μg/ml)对CBMC进行刺激，置于二氧化碳培养箱中孵育。72小时后离心并收集上清液置于-80℃冰箱保存。
　　 3.血清学检查:应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)直接定量测定CBMC培养上清液中IL-17、IL-23、IFN-γ的含量。
　　 4.随访:随访记录174例新生儿生后1年内患有呼吸系统、消化系统、泌尿系统感染性疾病的次数。感染性疾病的临床诊断依据参照诸福棠主编的实用儿科学（第七版）、沈晓明主编的儿科学（第七版）。根据感染次数将研究对象进行分组，0组即婴儿期患有感染性疾病的总频率为0，1组即婴儿期患有感染性疾病的总频率为1，以此类推;在对各系统感染性疾病次数进行分组时，0组代表婴儿期患有该系统感染性疾病的频率为0，1组代表婴儿期患有该系统感染性疾病的频率为1，以此类推。
　　 5.统计学分析:应用SPSS18.0统计学软件对所得资料进行统计分析，数据以x±s表示。应用单因素方差分析、多元线性回归分析法对数据进行处理，P＜0.05为差异有统计学意义。
　　 结果：
　　 1.4组与5组间IL-17A水平无显著性差异(P＞0.05)，其余各组间IL-17A水平均存在显著性差异(P＜0.05)。
　　 2.1组与2组之间、4组与5组之间IL-23水平无显著性差异(P＞0.05)，其余各组间IL-23水平均存在显著性差异(P＜0.05)。
　　 3.0、1、2、3组之间、3组与4组之间、4组与5组之间IFN-γ水平无显著性差异(P＞0.05)，其余各组间IFN-γ水平均存在显著性差异(P＜0.05)。
　　 4.三种细胞因子与婴儿期感染性疾病的次数存在相关性(P＜0.05)，其中IFN-γ与感染性疾病次数的相关性最强(Pearson相关系数=-0.571)，其次为IL-17A(Pearson相关系数=-0.430)，IL-23与感染性疾病次数的相关性最弱(Pearson相关系数=-0.240)。
　　 5.IFN-γ、IL-17A与婴儿期呼吸系统感染的次数存在明显的负相关(P＜0.05)，IL-23与婴儿期呼吸系统感染的次数无明显的相关性(P＞0.05)。
　　 6.IFN-γ、IL-23与婴儿期消化系统感染的次数存在负相关(P＜0.05)，IL-17A与婴儿期消化系统感染的次数无明显的相关性(P＞0.05)。
　　 7.三种细胞因子与婴儿期泌尿系统感染的次数无明显的相关性(P＞0.05)。
　　 结论：
　　 1.脐血IL-17A、IL-23、IFN-γ水平与生后1年内发生感染性疾病的次数负相关，提示IL-17A、IL-23和IFN-γ均参与了机体的抗感染免疫应答。
　　 2.Th17相关细胞因子可能通过影响先天性免疫系统状态及后天性免疫系统发育而影响感染性疾病的发生与发展。
　　 3.虽然Th17细胞在抗感染免疫反应中占据重要地位，IFN-γ仍然是参与炎症反应的主要细胞因子。