间期荧光原位杂交技术检测骨髓增生异常综合征患者染色体异常的研究

摘要

目的:
　　 1.本研究对确诊的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes，MDS)患者进行间期荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization，FISH)异常克隆检测，检测结果同常规染色体核型分析结果进行比较，确立FISH在MDS诊断中的意义。
　　 2.分析比较不同WHO分类下和不同国际预后评分系统中的FISH和常规核型分析染色体异常阳性率，对每一例MDS患者分别进行基于常规核型分析和FISH检测染色体异常结果的IPSS评分，建立合适的染色体预后评判标准。
　　 方法:
　　 选取2:011年3月至2012年6月在山东大学附属省立医院血液科确诊的MDS患者80例，其中难治性贫血(refractory anemia, RA)39例，RA伴环状铁粒幼细胞(refractory anemia with ringed sideroblasts，RAS)1例，RA伴多系病态造血(Refractory Cytopenia with Multilineage Dysplasia，RCMD)27例，RA伴原始细胞过多-1（refractory anemia with excess of blasts-1，RAEB-1）5例，RA伴原始细胞过多-2(refractory anemia with excess of blasts-2，RAEB-2)4例，MDS-未分类(MDS-U)3例，MDS伴单纯5q-1例。另选取正常对照20例。对80例患者采用24h短期培养法制备染色体标本进行G显带分析得出染色体结果，然后对80例患者和20例对照者进行包含-5/5q-，+8，-7/7q-，20q-，-Y探针组合的FISH检测，比较两种方法检测MDS患者异常克隆的阳性率，同时比较不同WHO亚型及不同IPSS评分等级中染色体异常检出率的差异。
　　 结果:
　　 80例MDS患者经FISH技术检出染色体异常43例(53.8％)，明显高于常规染色体核型分析的异常核型检出率17例(21.3％)，两者比较有统计学意义(P＜0.05);各世界卫生组织（The world health organization，WHO）亚型中，FISH异常检出率高于常规核型分析，其中RA的FISH异常检出率41.0％(16/39)明显高于常规核型分析检出率15.4％(6/39)，RCMD的FISH异常检出率55.6％(15/27)也明显高于常规核型分析检出率11.1％(3/27)，将两组患者的阳性率结果进行统计学分析，发现存在差异性;不同国际预后积分系统(The international prognostic score system，IPSS)中，FISH阳性率也明显高于常规核型分析，其中中危-1组患者FISH阳性率62.0％(31/50)明显高于常规核型分析阳性率19.6％(12/56)，中危-2组患者FISH阳性率57.1％(2/7)也明显高于常规核型分析阳性率28.6％(2/7)，两组患者FISH和常规核型分析阳性率比较差异具有统计学意义。
　　 结论:
　　 FISH技术在检测MDS常见染色体异常中敏感性优于常规核型分析，可以检测出常规核型分析分析失败及正常的染色体异常克隆，提高异常染色体的检出率，有助于MDS的诊断和鉴别诊断，这一点主要体现在IPSS中的中危组患者;各WHO分类中，RA和RCMD组患者从FISH中获益较大。

目录

声明

摘要

英汉缩略语对照

引言

材料与方法

1 研究对象病例采集

2 正常对照组的样本采集

3 主要的试剂和来源

4 主要的实验仪器

5 实验方法

6 统计学分析

实验结果

1．常规细胞遗传学分析(常规核型分析)结果

2．FISH分析结果

3．MDS患者常规核型分析和FISH结果总体比较分析

4．不同WHO亚型常规核型分析和FISH的结果比较

5．不同IPSS中常规核型分析和FISH的结果比较

6．不同染色体异常类型的比较

7．复杂核型的比较

讨论

结论

附图和附表

参考文献

综述

致谢

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