FHIT与TSLC1基因表达与宫颈癌发生及HPV感染的相关性研究

摘要

背景和目的:
　　宫颈癌为妇科常见恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌，其在发展中国家的发病率明显高于发达国家，近年来还呈现出逐年年轻化的趋势。大量流行病学数据显示，高危型人乳头瘤病毒(High risk Human papillomavirus，HR HPV)持续性感染是导致宫颈癌发生发展的主要危险因素，然而在HPV感染的人群中，仅有极少数的患者发展成为宫颈癌，而且很多宫颈癌的患者并不都能检测出HPV感染。因此目前研究普遍认为宫颈癌是环境与遗传等多种因素在多个环节上共同作用的结果，这其中抑癌基因的失活被认为在宫颈癌的发生发展中发挥着重要作用。脆性组氨酸三联体基因(Fragile Histidine Triad gene，FHIT)和肺癌肿瘤抑制因子1(tumor suppressor in lung cancer1，TSLC1)是近年来发现的两种候选抑癌基因，这两种基因的表达缺失与多种肿瘤的发生发展相关。
　　本研究通过对宫颈癌组织、不同级别的宫颈上皮内瘤样病变组织和正常组织的HPV感染情况、FHIT基因和TSLC1基因的表达情况进行检测，探讨FHIT与TSLC1基因表达与宫颈癌发生及HPV感染的相关性，为早期诊断宫颈癌提供参考依据。
　　方法:
　　选取2012年6月至2013年6月在聊城市人民医院妇产科行门诊及住院治疗的宫颈癌及其他妇科疾病患者共计180例为研究对象，收集基本临床资料，通过病理科宫颈活体检查或手术切除组织获得石蜡包埋组织标本。根据发病情况，将样本分为炎症组、CIN组、宫颈癌组和正常组织组。采用Trizol试剂盒提取组织样本总RNA，RT-PCR技术检测组织样本中FHIT基因和TSLC1基因表达情况，采用HC2基因杂交捕获仪以及HPV-DNA检测试剂盒对样本的HPV-DNA进行检测。利用SPSS17.0统计软件包对数据进行统计学分析。
　　结果:
　　1.宫颈癌组、CINⅢ组、CINⅡ组、CINⅠ、炎症组、正常组样本的HPV感染阳性率分别为91.43％、85.00％、60.00％、40.00％、5.71％和0％，相较于对照组，宫颈癌组、CINⅢ组、CINⅠ组、CINⅠ组的HPV感染率显著增高，结果具有统计学差异(P＜0.05)。
　　2.宫颈癌组、CINⅢ组、CINⅡ组、CINⅠ组、炎症组、正常组样本的FHIT基因表达阳性率分别为5.71％、35.00％、56.00％、72.00％、100.00％和100.00％，相较于对照组，宫颈癌组、CINⅢ组、CINⅡ组、CINⅠ组的FHIT表达率显著降低，结果具有统计学差异(P＜0.05)。
　　3.宫颈癌组、CINⅢ组、CINⅡ组、CINⅠ组、炎症组、正常组样本的TSLC1基因表达率阳性率分别为2.86％、30.00％、52.00％、68.00％、100.00％和100.00％。相较于对照组，宫颈癌组、CINⅢ组、CINⅡ组、CINⅠ组的TSLC1表达率显著降低，结果具有统计学差异(P＜0.05)。
　　4.FHIT与TSLC1因的表达情况与HPV的感染率具有相关性，且FHIT与TSLC1表达缺陷的患者其HPV感染率显著高于HIT与TSLC1基因正常表达的患者。
　　5.采用FHIT表达诊断宫颈癌的灵敏性为85.62％，特异性为82.3％，采用TSLC1表达诊断宫颈癌的灵敏性为88.52％，特异性为83.4％，采用FHIT和TSLC1联合诊断诊断宫颈癌的灵敏性为94.23％，特异性为95.3％，说明TSLC1与FHIT联合诊断子宫癌的临床价值较TSLC1或FHIT单一诊断的价值高，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:
　　通过对180例不同病变程度的宫颈组织的HPV感染情况、FHIT基因与TSLC1基因的表达情况进行测定，得到以下结论:
　　1.不同级别的CIN和宫颈癌存在HPV感染，而且CIN的级别越高，HPV的检出率越高，宫颈癌患者的HPV检出率高于CINⅢ的患者;
　　2.CIN组和宫颈癌组存在FHIT基因和TSLC1基因的失表达现象，而且CIN的级别越高，FHIT基因和TSLC1基因表达阳性率越低，宫颈癌患者的FHIT基因和TSLC1基因表达阳性率最低;
　　3.FHIT与TSLC1表达缺陷的患者其HPV感染率显著高于FHIT与TSLC1基因正常表达的患者;
　　4.将FHIT基因和TSLC1基因进行联合检测能够提高临床宫颈癌的诊断符合率，为宫颈癌的临床防治提供新的研究思路。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

材料和方法

1．材料

2．实验方法

3．评价指标

4．统计学分析

结果

2．1 不同组患者年龄构成情况比较

2．2 不同子宫颈组织样本中FHIT与TSLC1表达情况分析

2．3 不同子宫颈组织样本中HR-HPV感染情况分析

2．4 HPV感染与FHIT及TSLC1表达的相关性分析

2．5 TSLC1与FHIT联合诊断的敏感性及特异性分析

讨论

结论

参考文献

综述 人乳头瘤病毒感染与宫颈癌的相关性研究进展

附图

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文