声明
摘要
符号说明
第一章 前言
1.1 内皮功能紊乱说
1.1.1 血管内皮细胞
1.1.2 单核细胞和巨噬细胞
1.1.3 丝裂原激活的蛋白激酶
1.1.4 NFκB
1.2 中药水蛭的研究概况
1.2.1 中药水蛭的药理研究
1.2.2 中药水蛭在心脑血管疾病中的应用及研究
1.3 淫羊藿苷的研究概况
1.3.1 淫羊藿苷的药理研究
1.3.2 淫羊藿苷在动脉粥样硬化中的应用及研究
第二章 水蛭酶解提取物和淫羊藿苷抑制ApoE敲除小鼠动脉粥样硬化进展
2.1 实验材料
2.1.1 实验仪器
2.1.2 实验动物
2.1.3 实验耗材
2.1.4 实验试剂
2.1.5 试剂配制
2.2 实验方法
2.2.1 实验动物分组
2.2.2 超声生物显微镜(UBM)
2.2.3 实验动物解剖及心脏、主动脉取材
2.2.4 组织冰冻切片
2.2.5 油红O染色
2.2.6 HE染色
2.2.7 免疫组化染色
2.2.8 数据处理及统计学
2.3 实验结果
2.3.1 超声生物显微镜(UBM)观察主动脉弓处动脉粥样硬化斑块
2.3.2 主动脉根部动脉粥样硬化斑块油红O染色
2.3.3 主动脉弓动脉粥样硬化斑块MOMA-2染色
2.3.4 小鼠血清中细胞因子检测
2.4 讨论
2.5 本章小结
第三章 水蛭酶解提取物抑制内皮细胞功能紊乱
3.1 实验材料
3.1.1 实验仪器
3.1.2 实验耗材
3.1.3 实验试剂
3.1.4 引物序列
3.1.5 试剂配制
3.2 实验方法
3.2.1 细胞培养
3.2.2 内皮功能紊乱细胞模型
3.2.3 总RNA提取
3.2.4 逆转录(RTPCR)
3.2.5 PCR扩增
3.2.6 琼脂糖凝胶电泳
3.2.7 MTT实验(药物细胞毒性检测)
3.2.8 细胞总蛋白质提取
3.2.9 BCA法蛋白质定量
3.2.10 蛋白质免疫印迹(western blot)
3.2.11 NO含量测定
3.2.12 粘附能力实验
3.2.13 迁移能力实验
3.2.14 数据处理及统计学
3.3 实验结果
3.3.1 TNF-α诱导的EA.hy926内皮细胞功能紊乱模型及药物作用剂量筛选
3.3.2 粘附能力实验
3.3.3 迁移能力实验
3.3.4 粘附和迁移相关蛋白检测
3.4 讨论
3.5 本章小结
第四章 水蛭酶解提取物抑制动脉粥样硬化进展的机制研究
4.1 实验材料
4.1.1 实验仪器
4.1.2 实验耗材
4.1.3 实验试剂
4.2 实验方法
4.2.2 western blot蛋白质免疫印迹
4.3 实验结果
4.3.2 Western blot检测NF-κB p65亚基的核转移情况
4.3.3 LEE对MAPK信号通路上相关蛋白p38、ERK、JNK的磷酸化的影响
4.4 讨论
4.5 本章小结
第五章 淫羊藿苷抑制动脉粥样硬化进展机制的研究
5.1 实验材料
5.1.1 实验仪器
5.1.2 实验试剂
5.1.3 实验耗材
5.2 实验方法
5.2.1 总RNA提取
5.2.2 逆转录及PCR扩增
5.2.3 实时定量PCR
5.2.4 基因芯片表达谱分析
5.2.5 迁移实验
5.3 实验结果
5.3.1 小鼠主动脉管壁中CX3CR1和CX3CL1表达水平检测
5.3.2 基因芯片表达谱分析
5.3.3 巨噬细胞CX3CR1转录水平及表达水平检测
5.3.4 迁移实验
5.4 讨论
5.5 本章小结
第六章 总结
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
学位论文评阅及答辩情况表