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拟南芥糖基转移酶基因UGT73C4参与抗病的作用分析

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摘要

符号说明

一前言

1植物糖基转移酶与糖基化修饰

1.1糖基转移酶的定义、分类和特点

1.2糖基转移酶的生物学功能

1.3糖基转移酶的未来应用

2植物的免疫反应

2.1植物免疫的分类与特点

2.2微生物识别模式触发的免疫反应

2.3效应蛋白触发的免疫反应

2.4植物免疫与SA的关系

3本研究的目的和意义

3.2本课题的立题依据和研究内容

二材料与方法

1.实验材料

1.4主要培养基

1.5主要溶液配方

2.实验方法

2.1植物材料种植

2.2植物过表达载体构建及转基因植株的获得

2.3 CRISPR/Cas9基因敲除载体构建及突变体植株的获得

2.4 T-DNA插入突变体的鉴定和获得

2.5原核表达载体的构建与蛋白纯化

2.6植物GUS报告载体的构建及转基因植株的获得

2.7病原细菌Pst DC3000诱导分析

2.9转基因植物抗病相关生理指标分析测定

2.10 Foc699-GFP感染实验

2.11实验数据的统计学处理

三结果与分析

1.2UGT73C4启动子:GUS转基因植株的获得和基因表达模式分析

2.UGT73C4转基因植株的获得与鉴定

2.3 UGT73C4 CRISPR/Cas9载体的构建和突变体株系的获得

2.4UGT73C4的T-DNA插入突变体的鉴定与获得

3.UGT73C4基因在植物抵御病原细菌侵害中的作用

3.2UGT73C4突变体和过表达体中抗病相关的生理指标

3.3UGT73C4对烟草叶片的瞬时转化实验

3.4UGT73C4突变体和过表达体中抗病相关基因表达的差异

3.5UGT73C4突变体和过表达体中SA含量的比较

3.6病原菌对UGT73C4的诱导表达部分依赖于SA

4.UGT73C4基因在檀物根部表达并参与真菌的抗病作用

4.3UGT73C4突变体和过表达体根中Foc699-GFP荧光含量检测

4.4UGT73C4突变体和过表达体根中Foc9-GFP荧光观察

4.6UGT73C4突变体和过表达体中抗真菌相关基因表达的差异

4.7UGT73C4基因在根部受Me-JA诱导表达

4.8土壤真菌侵染后不同株系根部的活性氧积累

5原核表达载体的构建及酶蛋白纯化和体外酶促反应

5.1原核表达载体的构建

5.3体外酶促反应与底物筛选

四讨论

3糖基转移酶UGT73亚家族在植物抗病性适应进化中的功能

五论文创新点与不足之处

六其它基因的研究总结

七在校期间发表文章和奖励

附表

参考文献

致谢

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