声明
摘要
符号说明
第一章前言
1．1肿瘤发生及其治疗的研究概述
1．2猴头菌属真菌及高山猴头菌简介
1．3猴头菌属真菌来源的天然产物在抗肿瘤方面的研究概述
1．4天然产物的抗肿瘤作用机制
1．4．1诱导细胞凋亡
1．4．2抑制肿瘤细胞转移
1．4．3调节生物反应
1．4．4抑制肿瘤血管生成
1．4．5免疫调节
1．4．6其他作用机制
1．5肿瘤细胞发生氧化应激涉及的相关要素
1．5．1活性氧(ROS)
1．5．2 DNA损伤和DNA损伤应答(DDR)
1．5．3应激活化蛋白激酶(JNK)
1．5．4硫氧还蛋白系统
1．6本课题的研究目的和意义
参考文献
第二章大型真菌Hericium alpestre的次级代谢产物分离纯化和结构鉴定及部分化合物的体外细胞毒活性
2．1引言
2．2实验材料
2．2．1试剂及耗材
2．2．2主要设备和仪器
2．2．3真菌培养基
2．2．4细胞培养液
2．2．5肿瘤细胞株及培养条件
2．2．6常用薄层层析显色剂
2．3实验方法
2．3．2葡聚糖凝胶柱层析法(Sephadex LH-20)
2．3．3硅胶柱正相层析法
2．3．4薄层层析法
2．3．5重结晶
2．3．10 X射线单晶衍射分析法
2．3．11旋光测定分析
2．3．12圆二色谱分析
2．3．13细胞毒实验
2．4实验结果
2．4．1 Hericium alpestre的固体发酵和发酵产物的提取
2．4．2第一批粗提物的分离纯化
2．4．3第二批粗提物的分离纯化
2．4．4化合物的结构鉴定
2．4．5化合物LN1、LN2及LN3的细胞毒实验
2．5本章小结
参考文献
第三章Sambutoxin的抗肿瘤活性与作用机制研究
3．1引言
3．2实验材料
3．2．1化合物／药物
3．2．2细胞株
3．2．3动物
3．2．4试剂
3．2．5试剂配制
3．2．6主要设备和仪器
3．3实验方法
3．3．1细胞培养
3．3．2细胞生长抑制实验
3．3．3 Hoechst 33258染色实验
3．3．4细胞内活性氧水平检测实验
3．3．5线粒体膜电位实验
3．3．6细胞周期检测实验
3．3．7 Annexin V-FITC／PI双染实验
3．3．9 Western Blot实验
3．3．10裸鼠体内荷瘤实验
3．3．11统计学数据分析
3．4实验结果
3．4．1 Sambutoxin对多种肿瘤细胞系体外增殖的抑制作用
3．4．2 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF-7细胞系体外增殖的抑制作用
3．4．3 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF-7细胞系的细胞周期阻滞作用
3．4．4 Sambutoxin诱导MDA-MB-231和MCF-7细胞凋亡
3．4．5 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF7细胞活性氧水平的影响
3．4．6 Sambumxm引起MDA-MB-231和MCF-7细胞的DNA损伤并激活ATM／Chk2途径的DNA损伤应答
3．4．7 Sambutoxin通过内源性凋亡途径介导了MDA-MB-231和MCF-7细胞凋亡
3．4．8 Sambutoxin通过激活ROS／JNK信号通路诱导细胞凋亡
3．4．9 Sambutoxin对裸鼠移植瘤的生长抑制作用和相关作用机制
3．5本章讨论
3．6本章小结
参考文献
第四章Sambutoxin诱导乳腺癌细胞内活性氧水平异常上调的机制研究
4．1引言
4．2实验材料
4．2．1化合物／药物
4．2．2细胞株
4．2．3试剂
4．2．4试剂配制
4．2．5主要设备和仪器
4．3实验方法
4．3．1细胞培养
4．3．2 Western blot实验
4．3．3硫氧还蛋白还原酶活性检测
4．3．4谷胱甘肽还原酶活性检测
4．3．5总巯基含量检测
4．3．6还原型谷胱甘肽含量检测
4．3．7硫氧还蛋白过氧化物酶活性检测
4．3．8谷胱甘肽过氧化物酶活性检测
4．3．9统计学数据分析
4．4实验结果
4．4．2 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF-7细胞中硫氧还蛋白氧化还原酶活性的影响
4．4．4 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF-7细胞中硫氧还蛋白过氧化物酶活性的影响
4．4．5 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF-7细胞中谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响
4．4．6 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF-7细胞中总巯基含量的影响
4．4．7 Sambutoxin对MDA-MB-231和MCF-7细胞中还原型谷胱甘肽含量的影响
4．5本章讨论与结论
参考文献
第五章全文总结
附录
致谢
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