声明
摘要
1．1链霉菌
1．1．1链霉菌概述
1．1．2天蓝色链霉菌概述
1．1．3天蓝色链霉菌分化发育过程
1．1．4天蓝色链霉菌中的次级代谢产物
1．2 IclR转录调控因子家族特征
1．2．1 IclR家族结构与功能
1．2．2 IclR家族特异性
1．3立题依据与研究内容
第二章实验材料和方法
2．1．1菌株和质粒
2．1．2引物
2．1．3培养基
2．1．4抗生素保存和使用浓度
2．2．实验方法
2．2．1链霉菌的菌种保藏及培养
2．2．3获得天蓝色链霉菌突变株△2832和回补菌株C-△2832
2．2．4表型分析实验
2．2．5天蓝色链霉菌总RNA的提取
2．2．6 M145与△2832的转录水平差异分析
2．2．7构建、表达和纯化His-SC02832融合蛋白
2．2．8 SDS-PAGE电泳检测His-SC02832融合蛋白
第三章实验结果与分析
3．2获得△2832和C-△2832
3．2．1构建突变质粒pZX-SC02832
3．2．2筛选和验证突变株△2832
3．2．4构建、筛选、验证回补菌株C-△2832
3．3链霉菌表型分析
3．3．1 M145、△2832和C-△2832的表型观察
3．4链霉菌次级代谢产物合成分析
3．4．1测定放线紫红素(ACT)的相对含量
3．4．2测定十一烷基灵菌红素(RED)的相对含量
3．5 M145与△2832的RNA-seq转录水平分析
3．6定量分析(Realtime-PCR)野生型和突变株基因表达差异
3．6．1 act基因的定量分析
3．6．2 red基因的定量分析
3．6．3 cda基因的定量分析
3．7获得异源表达的SC02832蛋白
4．1全文总结
4．2研究展望
附录
参考文献
致谢
