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海蒿子水溶性多糖的提取、分离及抗癌活性研究

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引言

第一章海蒿子水溶性多糖的提取

1.1材料、试剂、仪器

1.1.1材料

1.1.2试剂

1.1.3仪器

1.2实验部分

1.2.1海蒿子藻体的前处理

1.2.2海蒿子粗多糖的水提取

1.2.3海蒿子粗多糖的酸提取

1.2.4海蒿子粗多糖总糖含量的测定

1.2.5海蒿子粗多糖的SO42-含量的测定

1.3结果与讨论

1.3.1海蒿子粗多糖的水提取

1.3.2海蒿子粗多糖的酸提取

1.3.3海蒿子粗多糖总糖含量的测定

1.3.4海蒿子粗多糖硫酸根含量的测定

1.4小结

第二章海蒿子粗多糖的纯化

2.1材料、试剂、仪器

2.1.1材料

2.1.2试剂

2.1.3仪器

2.2实验部分

2.2.1B型硅胶柱层析纯化粗多糖

2.2.2 DEAE-SEPHADEX A-25凝胶柱层析纯化粗多糖

2.2.3纯化后多糖总糖含量的测定

2.2.4纯化后多糖硫酸根含量的测定

2.3结果与讨论

2.3.1B型硅胶纯化粗多糖

2.3.2DEAE-SEPHADEX A-25凝胶柱层析纯化粗多糖

2.4小结

第三章海蒿子多糖的结构测定及单糖组成分析

3.1材料、试剂、仪器

3.1.1材料

3.1.2试剂

3.1.3仪器

3.2实验部分

3.2.1海蒿子多糖的紫外光谱

3.2.2海蒿子多糖的红外光谱

3.2.3海蒿子多糖的降解

3.2.4海蒿子多糖的单糖组成分析

3.3结果与讨论

3.3.1海蒿子多糖的紫外光谱

3.3.2海蒿子多糖的红外光谱分析

3.3.3海蒿子多糖的单糖组成分析

第四章海蒿子多糖的抗癌活性研究

4.1方法

4.1.1 MTT法

4.1.2 SRB法

4.2结果与讨论

结论

参考文献

在学期间的研究成果及发表的学术论文

附录

致谢

学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明

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摘要

中药海蒿子是褐藻门,马尾藻科,马尾藻属的一种海藻,学名为Sargassumpallidum。广泛分布于青岛、烟台、大连等近海海域,海蒿子中含有海蒿子多糖等多种活性成分,具有广阔的应用开发潜力。  本文选取采集于烟台长岛海域的海蒿子为研究对象,将其晾干粉碎过筛。海蒿子干粉经氯仿脱脂后,采用热水和稀酸室温提取得到粗多糖W、H。将粗多糖W、H,分别用B型硅胶柱和DEAE-SephadexA-25凝胶柱分离,前者用蒸馏水洗脱得到B级分(BW、BH),后者用不同浓度的NaCl梯度洗脱,得到DE级分(DEW1、DEW2、DEH1、DEH2)。用苯酚硫酸法测各级分的总糖含量,用比浊法测硫酸根含量。紫外光谱对纯化前后的多糖溶液在200-400nm范围扫描,图谱显示在260nm、290nm处DE级分无核酸和蛋白质吸收峰。红外吸收光谱测定表明纯化后的海蒿子多糖结构中含吡喃糖苷键。用薄层层析法与气相色谱-质谱法确定八种级分其单糖组成均为葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、果糖、木糖、甘露糖。将粗多糖W、H及DE级分分别做抗癌活性鉴定,结果显示均有抗癌活性。

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