穿山龙和生芪降糖颗粒对糖尿病大鼠的疗效观察和作用机制的研究

摘要

目的：探讨穿山龙对胰岛素抵抗的糖尿病大鼠的治疗作用及其作用机制。方法：正常组一直饲以普通饲料。实验组随机分为穿山龙组、文迪雅组、对照组，以高脂饲料饲养一个月+腹腔注射小剂量链脲佐菌素(30mg/Kg)制备胰岛素抵抗的糖尿病大鼠模型，以非空腹血糖(GLU)≥16.7mmol/L为造模成功。按血糖重新分组为穿山龙组、文迪雅组、对照组。正常组给予蒸馏水灌胃，实验组分别给予穿山龙、文迪雅、蒸馏水灌胃，至血糖下降至正常组平均水平或与造模时相比有显著性差异为治疗有效，有效者处死，若至总灌胃时间三个月时则无论是否治疗有效均处死，测定各实验阶段的体重、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、胰岛素(Ins)。留取肝脏、肾脏、肾周脂肪组织、股四头肌以液氮保存，并留取肝脏、肾脏、胰腺以10％中性福尔马林固定。采用免疫组织化学方法行肝脏、肾脏NF-κB活性检测，并行HE染色对肝脏、肾脏、胰腺进行组织形态学观察；采用RT-PCR方法检测脂肪、肌肉组织GLUT4mRNA表达量的变化，检测脂肪组织PPAR-γmRNA表达量的变化，检测脂肪组织TNF-αmRNA表达量的变化，检测肾脏TGF-β1mRNA表达量的变化。结果：①高脂饮食一月后实验组大鼠体重及胰岛素明显升高，注射STZ后实验组大鼠血糖明显升高；②药物干预后各实验组大鼠各实验阶段GLU、BUN、CRE、TC、TG、Ins和体重的差异均有显著性，其中穿山龙组和文迪雅组GLU明显下降，穿山龙组血糖较治疗前平均下降8.49mol/L(约40％)，文迪雅组血糖下降7.03mmol/L(约33％％)；两组胰岛素均明显高于对照组，且文迪雅组高于穿山龙组，但均未达到正常水平；各实验组的TC、TG均明显下降。⑨肝脏、肾脏核转录因子-κB(NF-κB)P65活性变化：对照组NF-κBP65活性较正常组显著升高，两组间比较差异有显著性(p＜0.05)。文迪雅组和穿山龙组肝脏NF-κBP65活性较对照组分别降低57.4％及50.0％，肾脏NF-κBP65活性较对照组分别下降50.0％及36.8％，与对照组相比差异有显著性(p＜0.05)，而与正常组相比差异无显著性(p＞0.05)。④肌肉、脂肪组织葡萄糖转运子4(GLUT4)mRNA表达量的变化：对照组GLUT4表达量较正常组显著降低，两组间比较差异有显著性(p＜0.05)。治疗后文迪雅组和穿山龙组肌肉GLUT4mRNA表达量较对照组均明显升高，其中穿山龙组肌肉组织和脂肪组织GLUT4mRNA表达量较对照组分别升高24.1％和16.0％，文迪雅组较对照组分别升高30.4％和19.8％，与对照组相比差异有显著性(p＜0.05)，而与正常组相比差异无显著性(p＞0.05)。⑤脂肪组织过氧化物酶增殖激活受体γ(PPAR-γ)mRNA表达量的变化：对照组PPAR-γmRNA表达量较正常组显著降低，两组间比较差异有显著性(p＜0.05)。治疗后文迪雅组和穿山龙组脂肪组织PPAR-γmRNA表达量较对照组分别升高67.6％和57.7％，与对照组相比有显著性差异(p＜0.05)，而与正常组相比差异无显著性(p＞0.05)。⑥炎症因子表达量的变化：对照组肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达量较正常组显著升高，两组间比较差异有显著性(p＜0.05)。文迪雅组脂肪组织TNF-α和肾脏TGF-β1mRNA表达量较对照组分别下降16.3％和24.8％，与对照组相比差异有显著性(p＜0.05)，而与正常组相比差异无显著性(p＞0.05)；穿山龙组TNF-α和TGF-β1mRNA表达量比对照组有所减少，但差异无统计学意义。结论：穿山龙与文迪雅有相似的降糖效果，且胰岛素增敏作用可能优于文迪雅，其改善胰岛素抵抗的机制可能是有着与文迪雅相同的激动PPAR-γ，增加GLUT4基因的表达，促进外周组织例如肌肉、脂肪组织对葡萄糖的转运和利用，抑制NF-κB活性。这为中药治疗胰岛素抵抗为主的2型糖尿病开辟了新途径，其有效成分有待进一步研究。

目录

第一部分穿山龙对糖尿病大鼠治疗作用及作用机制的观察

引言

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分生芪降糖颗粒对糖尿病大鼠的疗效及作用机制的研究

引言

实验材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献：

致谢

学位论文独创性声明及学位论文知识产权权属声明

综述 TNF-α、TGF-β、NF-κB与胰岛素抵抗及2型糖尿病的关系研究进展