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乙肝病毒感染性疾病与Fas系统相关性研究

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引言

第一章材料与方法

1 研究对象

2 主要试剂与仪器

3 实验方法

3.1外周血淋巴细胞的制备

3.2流式细胞仪检测外周血淋巴细胞凋亡

3.3流式细胞仪检测淋巴细胞表面表达的Fas/FasL

3.4双抗体夹心法检测血清中sFas/sFasL

3.5统计学分析

第二章结果

1 制备的外周血淋巴细胞

2.流式细胞仪检测外周血早期凋亡淋巴细胞

3 流式细胞仪检测外周血淋巴细胞表面表达的Fas/FasL

4.血清sFas/sFasL水平

第三章讨论

第四章结论

参考文献

第五章综述

攻读学位期间的研究成果

致谢

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摘要

目的:通过对乙型肝炎病毒感染相关性疾病患者外周血中淋巴细胞凋亡情况及细胞膜表面Fas/FasL的检测,结合乙肝病毒感染后患者血清中可溶性Fas/FasL(sFas/sFasL)水平的改变,探讨在疾病发生发展过程中,淋巴细胞表面所表达的Fas/FasL与血清sFas/sFasL之间的变化规律,期望进一步阐明乙肝病毒感染慢性肝细胞损害致重症化和肝细胞癌变的发病机制,为预防和治疗慢性乙型重型肝炎和肝细胞癌提供新的思路。 方法:采用流式细胞技术检测健康人、乙肝病毒携带者、慢性乙型重型肝炎患者、乙肝病毒相关性肝细胞癌患者外周血淋巴细胞的凋亡率及细胞表面表达Fas/FasL的情况;采用双抗体夹心法检测患者和健康人血清中sFas/sFasL的表达。 结果:(1)通过流式细胞技术检测证实,与正常对照组、无症状乙肝病毒携带组相比较,慢性乙型重型肝炎患者、乙肝病毒相关性肝细胞癌患者外周血淋巴细胞的凋亡率显著增高,差别有显著性(P<0.01)。(2)通过流式细胞技术检测证实,与正常对照组、无症状乙肝病毒携带组相比较,慢性乙型重型肝炎患者、乙肝病毒相关性肝细胞癌患者外周血淋巴细胞表面表达的Fas显著增高,差别有统计学意义(P<0.01);与正常对照组、无症状乙肝病毒携带组相比较,慢性乙型重型肝炎患者外周血淋巴细胞表面表达的FasL显著增高,差别有统计学意义(P<0.01),但是,乙肝病毒相关性肝细胞癌患者外周血淋巴细胞表面表达的FasL显著降低,与其他三组相比较,差别有统计学意义(P<0.01)。(3)双抗体夹心法证实,与正常对照组、无症状乙肝病毒携带组相比较,慢性乙型重型肝炎患者血清sFas和sFasL含量均显著增高,差别有显著性fP<0.01);乙肝病毒相关性肝细胞癌患者sFas含量明显增高,sFasL含量显著降低,差别有统计学意义(P<0.01)。 结论:(1)慢性乙型重型肝炎患者、乙肝病毒相关性肝细胞癌患者外周血淋巴细胞的凋亡率显著增高。(2)Fas/FasL在慢性乙型重型肝炎患者和乙肝病毒相关性肝细胞癌患者外周血.淋巴细胞中的表达存在明显差异。(3)sFas和sFasL在慢性乙型重型肝炎及乙肝相关性肝细胞癌之间存在明显差异。(4)Fas/FasL和sFas/sFasL的相互作用在淋巴细胞的凋亡中发挥着重要的作用,与慢性乙型重型肝炎、乙肝病毒相关性肝细胞癌的发病密切相关。

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