原位核酸杂交技术与免疫组化在宫颈病变HER-2/neu、HPV、P16检测中的应用价值

摘要

目的：研究显色原位杂交(CISH)、原位核酸杂交(ISH)及免疫组化(IHC)在宫颈病变中HER-2/neu基因及其蛋白产物CerbB-2、HPV、P16检测的应用价值，以及HER-2/neu、CerbB-2、HPV、P16在宫颈变化中的表达和相互关系。 方法：选取224例宫颈病变组织，采用组织微阵列技术制备宫颈病变组织芯片后分别应用显色原位杂交技术与免疫组化对224例石蜡包埋的人宫颈病变组织进行HER-2基因扩增和CerbB-2蛋白表达的检测，同时采用原位核酸杂交与免疫组化检测上述宫颈病变组织HPV6/11、HPV16/18DNA和P16蛋白的表达。对所得结果应用SPSS13.0统计分析软件进行卡方检验、spearman等级相关检验、一致性检验和Nemenyi秩和检验。 结果：(1)HER-2基因在宫颈炎、CIN和宫颈癌组扩增率分别为0％，6.2％(6/97)，37.9％(39/103)，三组之间HER-2扩增差异有显著性统计学意义(P<0.01)。CIN组与宫颈炎组、宫颈癌组与宫颈炎症组HER.2扩增差异均有显著性统计学意义(P<0.01)。CerbB-2蛋白阳性表达与宫颈鳞癌分化程度呈正相关(r=0.435，P<0.01)。(2)用CISH和IHC检测宫颈癌变组织中HER-2基因扩增和CerbB-2蛋白表达结果的总符合率为76.1％(71/92)，Kappa指数=0.516，且两者在各组病变中均呈显著正相关(P<0.01)。(3)HPV6/11在宫颈炎、CIN和宫颈癌组阳性表达率分别为16.7％(4/24)，39.2％(38/97)，68.9％(71/103)；HPV16/18阳性表达率分别为8.3％(2/24)，28.9％(28/97)，72.8％(75/103)，且在各组之间HPV16/18、HPV6/11阳性表达差异均有显著性统计学意义。(4)HPV16/18阳性表达与CIN级别呈正相关(r=0.213，P<0.05)；HPv6/11阳性表达与CIN级别具有负相关(r=-0.358，P<0.01)。(5)p16蛋白在宫颈炎、CIN及宫颈癌组中阳性表达率分别为29.2％(7/24)、68.0％(66/97)、95.1％(98/103)。P16阳性表达与CIN级别的呈正相关(r=0.615，P<0.01)；与宫颈鳞癌分化程度也具有正相关关系(r=0.435，P<0.01)。(6)在189例CIN和宫颈鳞癌中HER-2与P16、HER-2与HPV16/18、P16与HPV16/18之间均呈正相关，r值分别为0.180、0.167、0.299，P均小于0.05。 结论： (1)HER-2基因扩增可能在宫颈癌的发生发展中发挥重要的作用。准确检测HER-2状态可能为宫颈癌靶向性药物治疗提供重要依据。(2)IHC与CISH检测宫颈癌变组织HER-2基因扩增和CerbB-2蛋白表达具有良好的一致性。CISH是一种简便可靠、较成熟的检测HER-2基因的新方法。(3)HPV感染与CIN和子宫颈癌的发生、发展密切相关。HPV准确分型为临床进行个体化治疗和靶向清除病毒提供了可靠依据。(4)P16蛋白的表达随着宫颈病变程度的发展而逐渐升高。(5)P16与HPV16/18密切相关；p16协同hER-2在宫颈病变过程中发挥着重要作用；HPV16/18与HER-2的共同作用可能是宫颈癌发生发展的重要因素。

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论文说明：缩略词表

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引言

第一章材料与方法

1.1研究对象

1.2研究材料

1.3研究方法

1.4结果判定和统计方法

第二章结果

2.1组织芯片有效标本

2.2 HER-2基因在子宫颈病变中的扩增

2.3 C-erbB-2蛋白在子宫颈病变中的表达

2.4 不同宫颈组织中HER-2基因扩增和C-erbB-2蛋白表达的关系

2.5 CISH检测HER-2基因扩增与IHC检测C-erbB-2蛋白表达结果的符合情况

2.6 HPV16/18在宫颈病变中表达情况

2.7 在宫颈病变中HPV6/11的表达情况

2.8在宫颈病变中P16的表达情况

2.9 HER-2、P16和HPV16/18、在CIN和宫颈鳞癌中的关系

第三章讨论

第四章结论

附图

参考文献

文献综述(一)

文献综述(二)

致谢