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【6h】

GM6001对真菌性角膜炎角膜组织中基质金属蛋白酶表达及活性的影响

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1 引言

2材料和方法

2.1实验材料

2.1.1实验动物

2.1.2实验主要试剂及耗材

2.1.3主要仪器

2.2实验方法

2.2.1动物模型的建立与标本的获取

2.2.2组织病理学标本的制备

2.2.3 RT-PCR

2.3统计学分析

3结果

4讨论

5结论

6参考文献

附图

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摘要

目的:检测兔真菌性角膜炎角膜组织中基质会属蛋白酶-1(MMP-1)的表达,探讨MMP-1在真菌性角膜炎发病机制中的作用及其选择性抑制剂GM6001对兔真菌性角膜炎中MMP-1表达及活性的影响。 方法:75只新西兰大白兔随机分为A、B、C三组,右眼为实验眼,其中A组5只,作为正常对照组,B组35只兔,为真菌性角膜炎组,C组35只兔,为真菌性角膜炎CM6001治疗组。B、C组接种曲霉菌。C组接种曲霉菌后立即给予400μg/ml GM6001滴眼液点眼,4次/日。分别于接种后12h、24h、4d、7d、14d、21d、28d取角膜组织用半定量逆转录聚合酶链反应(semi-quantitative reverse transcription polymerasechain reaction,RT-PCR)方法检测兔角膜组织中MMP-1的表达,同时对不同时间点角膜组织行HE染色及光镜观察。 结果: 1.病理组织学检查:真菌性角膜炎是以真菌菌丝和孢子侵入及中性粒细胞浸润为主的广泛化脓性炎症。 2.半定量RT-PCR结果显示:(1)对照组及12h时相组角膜组织未检测到MMP-1 mRNA的表达,B组在接种真菌后24h开始出现MMP-1的表达,并随时间延长表达逐渐增高,各时间点比较差异有显著性(P<0.01)。(2)C组与B组比较,24h时相后,各时相MMP-1表达明显降低,差异有显著性(P<0.01)。 结论: 1、真菌性角膜炎角膜组织中MMP-1表达明显高于正常对照组,且其表达水平与真菌性角膜炎病程密切相关,提示MMP-1可能参与了真菌性角膜炎的发生与发展。 2、GM6001对真菌性角膜炎角膜组织中MMP-1的表达有明显的抑制作用,为临床上真菌性角膜炎的药物治疗提供了理论依据。

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