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豚鼠形觉剥夺性近视眼后极部巩膜基质金属蛋白酶2及其抑制剂的表达

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引言

第一章材料与方法

1.1实验动物和模型制备

1.2实验器材

1.3标本采集

1.4 RT-PCR方法半定量分析

1.4.1后部巩膜组织总RNA的提取(Trizol法)

1.4.2逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)

1.5统计学分析

第二章结果

2.1屈光度及眼轴长度

2.2 MMP-2 mRNA表达

2.3 TIMP-2 mRNA表达

第三章讨论

结论

参考文献

附图

综述:实验性近视后部巩膜基质重塑的研究

攻读学位期间的研究成果

致谢

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摘要

目的:探讨豚鼠形觉剥夺性近视(form-deprivation myopia,FDM)形成过程中后极部巩膜基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及其特异性组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metrix metalloproteinase-2,TIMP-2)mRNA表达。 方法:取4周龄三色豚鼠25只,随机分为5组,采用单眼形觉遮盖法(monocular deprivation,MD)分别遮盖右眼1、4、7、14、21天制备FDM动物模型,未遮盖眼为自身对照组,并随机选取同样数目、同龄、非遮盖豚鼠作为正常对照组。在实验前及相应的实验时间对各组豚鼠进行视网膜检影验光和A超测量眼轴长度。摘除眼球,提取后极部巩膜总RNA,采用二步法逆转录-聚合酶链反应检测各组豚鼠后极部巩膜中MMP-2、TIMP-2 mRNA表达水平。 结果:MD组后极部巩膜MMP-2 mRNA表达水平在MDld即开始增加,MD7d达高峰,随后其表达逐渐减少但仍高于正常水平,MD组间差异有高度统计学意义(P<0.01);除了MDld以外,其它MD组后极部巩膜MMP-2 mRNA表达与正常对照组、自身对照组间差别有统计学意义(P<0.05);自身对照组MMP-2 mRNA表达的变化趋势与MD组的大体一致,但表达水平均低于MD组,自身对照组间差别有高度统计学意义(P<0.01)。与此同时,MD组后极部巩膜TIMP-2 mRNA表达水平随着形觉剥夺时间延长而减少,MD组间表达差异有高度统计学意义(P<0.01);自身对照组TIMP-2 mRNA表达的变化趋势与MD组的一致,自身对照组间差别有高度统计学意义(P<0.01)。 结论:MMP-2/TIMP-2之间动态平衡失调很可能是启动豚鼠FDM巩膜细胞外基质早期主动重塑的重要因素。

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