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【6h】

硒对体外培养人甲状腺细胞氧化损伤、凋亡及超微结构的影响

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声明

引言

第一章材料与方法

1.1研究对象

1.2实验试剂

1.3实验仪器

1.4实验方法

第二章结果

2.1普通光镜下甲状腺细胞形态

2.2细胞鉴定

2.3硒与H2O2对甲状腺细胞存活率的影响

2.4硒与H2O2对甲状腺细胞凋亡率的影响

2.5硒与H2O2对甲状腺细胞GSH-Px的影响

2.6硒与H2O2对甲状腺细胞MDA的影响

2.7硒与H2O2对甲状腺细胞超微结构的影响

第三章讨论

结论

参考文献

综述 微量元素硒与甲状腺疾病

攻读学位论文期间的研究成果

致谢

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摘要

目的:研究硒对H2O2诱导的体外培养人甲状腺细胞氧化损伤、凋亡及细胞超微结构的影响。 方法:取良性甲状腺腺瘤手术中的腺瘤旁正常甲状腺组织进行细胞培养。加硒(10-7mol/L)或不加硒后加入不同浓度H2O2(0~800μmol/L)刺激单层培养的甲状腺细胞,MTT法检测细胞存活率;流式细胞术(FCM)检测各组甲状腺细胞凋亡率;收集不同浓度组细胞,测定细胞膜GSH-Px活性和MDA含量变化;透射电子显微镜下观察各组甲状腺细胞超微结构的改变。 结果:经过H2O2作用24小时的甲状腺细胞,其存活率下降、细胞凋亡率升高,细胞GSH-PX活力下降、MDA含量升高,在100-800Pmol/L浓度范围间表现为浓度-效应关系。电镜下单纯加硒组细胞超微结构与正常对照组相似。100-200μmol/LH2O2处理组甲状腺细胞呈损伤型改变。至400-800μmol/L H2O2处理组细胞出现凋亡甚至死亡。预先加入10-7mol/L几硒干预后可增加细胞存活率,降低细胞凋亡率,各组细胞较相应单纯H2O2处理组细胞的GSH-Px活力升高、MDA含量下降。硒预干预后各组细胞均可见亚细胞结构损伤明显减轻。 结论:H2O2可抑制甲状腺细胞生长,引起甲状腺细胞氧化损伤甚至细胞凋亡,硒对H2O2引起的甲状腺细胞氧化损伤和凋亡可能有拮抗作用。硒的这种作用可能是通过增加细胞GSH-Px活力和降低MDA含量来拮抗氧化应激途径实现的。

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