CIK杀伤胃癌的MHC限制性与非MHC限制性作用分析

摘要

目的：研究MHC限制性与非MHC限制性杀伤在细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外杀伤胃癌(SGC-7901)细胞中所起的作用。 方法：从正常人外周血单个核细胞诱导树突状细胞(DC)、CIK细胞，用人胃癌细胞SGC-7901提取肿瘤抗原致敏DC，DC诱导CIK生成DC诱导CIK细胞(DC-CIK)和经胃癌抗原致敏的DC诱导CIK细胞(抗原-DC-CIK)。培养的第14天，用流式细胞仪检测CIK、DC-CIK、抗原-DC-CIK细胞表型CD3、CD3/CD8和CD3/CD56。以CIK、DC-CIK和抗原-DC-CIK为效应细胞，以未经MHC分子阻断的SGC-7901细胞和经MHC分子阻断的SGC-7901细胞为靶细胞，用MTT法检测杀伤效应。 结果：①培养的第14天，抗原致敏的DC诱导CIK中CD3+ CD56+和CD3+ CD8+双阳性细胞的比例较DC-CIK和单独培养CIK明显增高(P均<0.01)。②效靶比为20:1时，CIK组、DC-CIK组、抗原-DC-CIK组对SGC-7901的杀伤活性分别为：(46.6±1.3)％、(52.6±0.9)％、(72.5±1.2)％（P均<0.01）：对经MHC分子阻断的SGC-7901的杀伤活性分别为：(44.3±0.6)％、(49.9±0.5)％、(50.4±1.1)％。抗原-DC-CIK中MHC限制性杀伤占总杀伤效力的比例明显高于DC-CIK和CIK。 结论：CIK杀伤胃癌细胞以非特异性杀伤为主，MHC限制性杀伤仅占总杀伤效力的4.9％；未致敏的DC诱导CIK后，总杀伤效力增强，以非特异性杀伤为主，MHC限制性杀伤效力增加不明显，占总杀伤效力的5.1％；抗原致敏的DC诱导CIK后，杀伤仍以非特异性杀伤为主，特异性杀伤效力大幅度增加，占总杀伤效力的30.5％。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一章材料与方法

1.1材料

1.1.1药物及试剂

1.1.2主要仪器

1.1.3实验细胞

1.2实验方法

1.2.1细胞培养液配制

1.2.2体外细胞培养

1.2.3检测SGC-7901胃癌细胞株存活率

1.2.4效应细胞制备

1.2.5 CIK、DC和抗原-DC-CIK的表型检测

1.2.6 MTT比色法测定效应细胞体外杀伤活性

1.3统计学处理

第二章结果

2.1 DC及CIK的形态学观察

2.1.1 DC的形态学观察

2.1.2 CIK的形态学观察

2.1.3 DC与CIK共同培养形态学观察

2.2 CIK和抗原-DC-CIK细胞表型分析

2.3效应细胞的体外细胞毒活性

第三章讨论

结论

参考文献

附图

综述 胃癌的生物治疗

攻读学位期间的研究成果

附录 中英文对照

致谢