基因转染血管内皮生长因子对放疗损伤咬肌组织新生血管生成影响的实验研究

摘要

目的:1.通过对大鼠咬肌组织进行放射损伤，观察放疗对大鼠的影响、放疗损伤后咬肌组织的病理变化及放疗后TGF-β1的表达情况;2.将血管内皮生长因子转染至放疗损伤的大鼠咬肌组织中，研究VEGF-A蛋白在各组的表达情况，以及基因转染血管内皮生长因子对放疗损伤咬肌组织血管生成的影响。
　　 方法:1用直线加速器对Wistar大鼠咬肌组织进行照射，总剂量40Gy，照射结束后取大鼠咬肌组织行HE染色，在光镜下观察大鼠咬肌组织的病理变化情况;2.放疗结束后1天，选一组作为VEGF治疗组，进行pcDNA4-HisMax-C/VEGF165基因转染(50ug/只)，另一组转染空质粒（50ug/只），作为治疗对照组，共治疗3次，间隔1周。于治疗结束后2周行TGF-β1、VEGF蛋白免疫组化染色，检测两种蛋白的表达情况;同时在光镜下观察各组血管密度，以检测VEGF基因转染对放疗损伤大鼠咬肌组织血管生成的影响。
　　 结果:1.在光学显微镜下发现经放射后的咬肌组织毛细血管中大量炎细胞浸润，血管内皮肿胀，管腔内有血栓形成，表明放疗使咬肌组织出现一定程度的病理损伤。2.免疫组化结果显示放射损伤组TGF-β1的表达明显高于正常对照组，重组质粒基因转染后咬肌组织VEGF蛋白表达明显高于放疗损伤组、空质粒转染组及正常对照组。3.经VEGF基因转染后，VEGF基因转染组咬肌组织血管密度与正常咬肌组织血管密度差异无显著性，与单纯放疗损伤组、空质粒组比较有显著差异。
　　 结论:1.经放疗后的大鼠咬肌组织出现病理损伤，并且血管密度明显降低，咬肌组织损伤模型建立成功。2.TGF-β1蛋白在放疗组表达明显升高，可以促进损伤组织的修复，VEGF蛋白表达在基因转染组高度表达，可促进放疗后组织血管的生成，从而促进放疗损伤的修复。

目录

摘要

引言

第一章 试剂与仪器

1．1 主要试剂

1．2 主要仪器

第二章 实验方法

2．1 大鼠放疗损伤模型的建立

2．2 VEGF基因转染

2．3 病理标本的制备

2．4 结果判定及统计学分析

第三章 结果

3．1 实验动物临床体征观察

3．2 组织病理学观察

3．3 TGF-β1在各组的表达情况

3．4 VEGF在各组的表达情况

3．5 统计学分析

第四章 讨论

4．1 大鼠放疗损伤模型的建立

4．2 TGF-β1在放疗损伤咬肌组织中的表达及其意义

4．3 VEGF基因转染后VEGF蛋白在咬肌组织中的表达及意义

4．4 小结

第五章 结论

参考文献

综述

攻读学位期间的研究成果

实验流程图

附录

致谢

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