实时荧光定量PCR法检测人骨肉瘤MG63细胞系中β-catenin基因的表达

摘要

目的:研究β-catenin基因在人骨肉瘤MG63细胞内的表达变化。
　　 方法:培养MG63细胞株,用不同浓度的wnt3a蛋白或者不同时间段用相同浓度的wnt3a刺激MG63细胞,用实时荧光定量PCR技术在mRNA水平检测β-catenin在MG63细胞内的表达变化。培养MG63细胞株,用相同浓度的wnt3a蛋白刺激,分别在不同的天数计细胞个数,比较刺激组与空白组的细胞数目的差别。
　　 结果:不同浓度的wnt3a蛋白(0ng/ml,50ng/ml,100ng/ml,150ng/ml,200ng/ml)刺激MG63细胞,细胞内β-catenin表达有变化;浓度为100ng/ml时,细胞内β-catenin表达水平最高。用100ng/ml的wnt3a刺激细胞不同的时间段0min,30min,1h,3h,6h,12h,24h结果分析beta-catenin表达量最高的时间段为6h。比较空白组与刺激组细胞增殖的区别,刺激组细胞增殖程度明显高于空白组。
　　 结论:β-catenin基因在人骨肉瘤wnt3aMG63细胞内的表达变化,证明wnt/β-catenin信号通路对人骨肉瘤MG63细胞有重要的调控作用。

目录

摘要

引言

第1章 实验材料与方法

1．1 实验材料

1．1．1 细胞系及细胞培养所需的主要试剂

1．1．2 实验中主要的试剂

1．1．3 实验中的主要仪器

1．2 实验方法

1．2．1 Wnt3a蛋白的准备

1．2．2 细胞培养

1．2．3 Wnt3a蛋白对骨肉瘤MG63细胞的刺激

1．2．4 细胞生长曲线的绘制

1．2．5 实时荧光定量PCR法检测β-catenin基因的表达

1．2．6 统计学分析

第2章 实验结果

2．1 MG63细胞的生长曲线

2．2 相同浓度的Wnt3a刺激MG63细胞不同时间段，细胞内β-catenin基因的表达量

第3章 讨论

结论

参考文献

综述：骨肉瘤的研究现状

攻读学位期间的研究成果

致谢

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