EPO对宫内感染脑白质损伤早产大鼠脑组织CD68、GFAP水平和神经行为学的影响

摘要

目的:通过检测脑组织内CD68、神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)水平的变化及评估神经行为学研究重组促红细胞生成素(rhEPO)对宫内感染导致脑白质损伤早产鼠的神经保护作用。
　　方法:选取20只孕15天的Wistar大鼠，按3∶1比例随机分为感染组(n=15)和对照组(n=5)，两组分别于孕15天腹腔注射脂多糖(LPS0.3mg/Kg)及等量的无菌生理盐水，于孕21天行剖宫产术取出胎鼠。两组分别随机取胎盘(n=10)和新生鼠脑组织(n=10)予苏木素-伊红染色观察病理变化。同时随机选取对照组中新生鼠40只为早产对照组;选取感染组中新生鼠80只，随机分为EPO治疗组(n=40)和感染对照组(n=40)。EPO治疗组于生后即刻腹腔注射rhEPO(5000IU/Kg)，早产对照组及感染对照组同时腹腔注射等量生理盐水。三组新生大鼠均分别于生后1天、3天、7天各取10只仔鼠行甲醛灌注取脑，利用免疫荧光染色检测脑组织中CD68和GFAP的水平;三组均于生后30天，各取10只仔鼠利用旷场试验、悬吊试验、斜坡试验、拒俘反应试验进行神经行为学观察。
　　结果:1.感染组孕鼠的胎盘血管充血、水肿，并可见大量中性粒细胞浸润。感染组中新生鼠的脑白质染色淡、结构疏松;神经纤维粗细不均，走向紊乱，可见核小、体积小、深染及少突起的欠分化神经元;胶质细胞数量增多，可见细胞核固缩、胞浆疏松、细胞皱缩等凋亡改变。
　　2.三组新生1日龄大鼠脑组织未见明显CD68、GFAP阳性染色;感染对照组及EPO治疗组两组3日龄、7日龄大鼠脑组织中CD68、GFAP水平较早产对照组均显著上升，各组间差异均具有统计学意义(P＜0.05); EPO治疗组3日龄、7日龄大鼠脑组织的CD68、6FAP水平较感染对照组均显著下降，差异具有统计学意义(P＜0.05)。EPO治疗组7日龄大鼠脑组织的CD68、GFAP较3日龄的水平显著下降，感染对照组7日龄大鼠脑组织的CD68、GFAP较3日龄的水平有所上升，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。
　　3.神经行为测试:感染对照组30日龄的大鼠神经行为学评分显著低于早产对照组;EPO治疗组的大鼠神经行为学评分明显高于感染对照组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:1.孕鼠腹腔注射LPS可以成功建立早产脑白质损伤大鼠模型。
　　2.新生早产大鼠早期应用rhEPO能够减轻宫内感染早产大鼠脑白质损伤的炎症反应及星形胶质细胞反应性增生，对宫内感染后的早产大鼠脑白质损伤有一定的治疗作用。
　　3.早期应用rhEPO可以改善宫内感染脑白质损伤的早产大鼠神经系统发育及认知功能。