1,25-二羟基维生素D3对支气管哮喘小鼠GATA-3及T-bet表达的影响

摘要

目的:初步探讨1，25二羟基维生素D3对支气管哮喘小鼠T淋巴细胞转录因子GATA-3、T-bet及炎症因子IL-33表达的影响，从分子水平探讨1，25二羟基维生素D3对哮喘小鼠炎症过程的作用及其机制，为1，25二羟基维生素D3在防治哮喘中的应用提供理论依据。
　　方法:采用随机数字表法，将32只昆明系小鼠随机分为4组:对照组（A组）、哮喘组（B组）、地塞米松干预组（C组）、1，25二羟基维生素D3干预组（D组），每组各8组。采用鸡卵清蛋白(OVA)致敏建立支气管哮喘小鼠模型，分别给予C、D两组地塞米松、1，25二羟基维生素D3干预治疗。密切观察4组小鼠行为学改变;HE染色评价各组小鼠气道炎症改变;观察肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类计数情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IgE、IL-33水平;免疫组织化学法结合阳性细胞光密度值测定检测各组小鼠肺组织中GATA-3、T-bet的表达。
　　结果:
　　(1)支气管肺泡灌洗液细胞计数: B组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞计数最高， C、D二组次之，A组最少，除C、D两组外，余各组间两两比较差异具有统计学意义（P均＜0.01）。
　　(2)血清IgE水平: A、B、C、D组相比，B组IgE水平表达最高，A组IgE水平最低，除C、D两组余各组间两两比较，差异具有统计学意义（P均＜0.01）;
　　(3)血清IL-33水平:以B组增高最明显，与其余3组相比差异均具有统计学意义（P均＜0.01），C组与D组较B组明显降低（P均＜0.01），但二组相比差异不具有统计学意义（P0.05）。其余各组两两比较，差异均具有统计学意义（P均＜0.01）。
　　(4)肺组织切片免疫组织化学染色结果显示，B组小鼠肺组织GATA-3表达增强最明显（P均＜0.01），C、D两组之间相比，GATA-3表达量无明显差异，(P均＞0.05)。T-bet表达B组最弱，C组之间T-bet表达无明显统计学意义（P＞0.05）。(5)线性相关性分析:血清IL-33与IgE水平呈正相关，差异具有统计学意义（r=0.842，P＜0.01）。
　　结论:
　　1.本实验研究研究表明，GATA-3与T-bet表达失衡很可能是支气管哮喘炎症形成的重要因素之一。
　　2.地塞米松抑制炎症可能是通过下调GATA-3蛋白表达并上调T-bet蛋白表达实现的。1，25二羟基维生素D3抑制炎症是通过下调GATA-3蛋白表达实现的，对T-bet蛋白表达的影响不大。二者抑制炎症作用机制不完全相同。
　　3.IL-33可以促进哮喘炎症反应，1，25二羟基维生素D3对其具有抑制作用。
　　4.1，25二羟基维生素D3具有抑制支气管哮喘小鼠气道炎症作用，为人类支气管哮喘防治提供一定的理论基础。