羟基红花黄色素A对四氯化碳所致大鼠肝纤维化的作用及机制研究

摘要

目的：探讨羟基红花黄色素A(hydroxysaffloryellow A，HYSA)对四氯化碳所致肝纤维化的作用及其机制。
　　方法；将36只SD大鼠随机分为三组:模型组、HYSA组和对照组，每组12只。以四氯化碳油溶液联合乙醇高脂肪饮食法制备大鼠肝纤维化模型，自造模的第2周起，模型组和HYSA组分别由腹腔注射NS(1ml/kg)和HYSA(10mg/kg)，每周5次，连续8周。对照组大鼠自第1周起每隔2d以3ml/kg剂量大豆油灌胃。于第9周末取大鼠肝组织，行HE染色、Masson染色，对肝纤维化程度进行评分;免疫组织化学检测各组大鼠肝组织TGF-β1、CTGF蛋白的表达。
　　结果：
　　①HE染色:模型组大鼠肝小叶结构紊乱，部分形成假小叶，肝组织纤维成分大量增生，以门管区最为明显，大量肝细胞发生气球变性及脂肪变性，可见肝细胞坏死。HYSA组大鼠肝小叶结构基本正常，无明显假小叶形成，小叶间结缔组织增生、细胞水肿及脂肪变性均较模型组少。对照组大鼠肝小叶形态正常，肝索及肝血窦形态正常。
　　②Masson染色:模型组大鼠胶原纤维增生明显，小叶周边区域形成大量纤维间隔，肝小叶结构紊乱，部分形成假小叶;HYSA组大鼠肝小叶周边胶原纤维不同程度增生，形成纤维间隔，但并无明显假小叶形成。对照组大鼠肝小叶结构正常，小叶周边及门管区有少量胶原纤维。
　　③大鼠肝组织的胶原纤维沉积面积、纤维化半定量评分:模型组高于对照组(P＜0.05)，HYSA组低于模型组（P＜0.05）。
　　④模型组大鼠肝组织的TGF-β1多表达于门管区及增生的胶原纤维，其表达比对照组高(P＜0.05)，HYSA组TGF-β1的表达低于模型组(P＜0.05)。对照组大鼠肝组织中的TGF-β1仅在门管区及小叶中央静脉的血管壁少量表达。
　　⑤CTGF表达于细胞质，模型组中CTGF的表达较多（高于对照组，P＜0.05），除分布于门管区外，小叶间结缔组织周围肝细胞及肝星状细胞中也有较多表达。CTGF表达于HYSA组大鼠肝组织中的肝细胞及门管区的细胞，表达量较模型组少（P＜0.05）。
　　结论：
　　①应用CCL4油溶液联合乙醇饮水加高脂肪饮食成功诱导大鼠肝纤维化动物模型。
　　②HYSA可以减轻CCL4油溶液复合法诱导的大鼠肝纤维化。
　　③HYSA通过减少肝脏TGF-β1、CTGF的表达减轻肝的纤维化。