异氟醚对人类胚胎干细胞自我更新能力及其分化的影响

摘要

目的：探讨异氟醚对人类胚胎干细胞自我更新能力及分化情况的影响。
　　方法：将传代后1天的细胞随机分为实验组和对照组，每组n=5。实验组细胞暴露于2％异氟醚、5%CO2和21%O2的混合气体6h；对照组细胞暴露于5%CO2和21%O2的混合气体6h。观察两组胚胎干细胞的生长情况，对两组细胞计数并检测两组细胞干性基因及各胚层标志性基因的mRNA水平。
　　结果：传代后第五天，两组细胞集落出现不同，实验组细胞数目明显低于对照组，差异有显著性（t=3.40，P<0.01）；实验组多能性基因（Nanog，Sox2，Oct4，Lin28）对应的mRNA水平低于对照组，差异有显著性（t=2.82～3.89，P<0.05）；实验组内胚层、中胚层、外胚层标志性基因（AFP，T，Nestin）对应的mRNA水平均高于对照组，差异有显著性（t=2.67～3.33，P<0.05）。
　　结论：异氟醚能够抑制离体人类胚胎干细胞的自我更新能力，并促进其提前分化。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

目录

引言

第一章 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞来源

1.1.2 主要试剂

1.1.3 主要仪器

1.1.4 引物来源及序列

1.2 实验方法

1.2.1 饲养层细胞的制备

1.2.2 人类胚胎干细胞的传代与培养

1.2.3 人类胚胎干细胞的实验处理

1.2.4 细胞计数方法

1.2.5 荧光定量PCR

1.3统计分析

第二章 结果

2.1 异氟醚对hESCs生长状态的影响

2.2 异氟醚对hESCs数目的影响

2.3 异氟醚对hESCs干性标志性基因表达情况的影响

2.4 异氟醚对hESCs分化状态的影响

第三章 讨论

第四章 结论

参考文献

文献综述:全身麻醉对胚胎及新生儿的影响的研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢

声明