人参皂苷Rg1通过甾体激素受体及胰岛素样生长因子-Ⅰ受体抑制BV-2小胶质细胞炎症反应的实验研究

摘要

人参皂苷Rg1（ginsenoside Rg1）是传统中药人参的主要药理成分。研究表明，Rg1具有抗炎、抗氧化、抗神经毒素等作用。小胶质细胞是神经系统中一种起免疫功能的细胞，过度激活的小胶质细胞会分泌一系列的炎性因子以及合成炎性因子的关键限速酶，这些物质会引发神经元损伤、死亡。因此小胶质细胞在神经退行性疾病的发生及发展中扮演着非常重要的作用。已有很多实验证据表明人参皂苷Rg1具有抗炎作用，但人参皂苷Rg1是通过何种机制发挥其抗炎作用，目前尚不清楚。研究显示Rg1具有甾体骨架结构，是糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）的功能性配体，可激活 GR。本课题组的前期工作证明人参皂苷Rg1具有类雌激素样作用，可通过雌激素受体（estrogen receptor，ER）和胰岛素样生长因子-Ⅰ受体（insulin-1ike growth factor-I receptor，IGF-IR）信号途径对抗神经毒素对神经元的损伤。但是，Rg1是否能通过 GR、ER及IGF-IR抑制BV-2小胶质细胞的炎症反应，未见报道。本实验通过采用免疫细胞荧光、real time PCR及western blot等多种技术方法，在脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）诱导的BV-2小胶质细胞炎症模型上，深入探讨了人参皂苷Rg1的抗炎作用机制。
　　本研究主要内容包括：⑴在蛋白以及基因水平上，LPS能够明显诱导BV-2小胶质细胞炎性因子的表达（P<0.05）。人参皂苷Rg1（10μM）可以抑制LPS的致炎作用（P<0.05）。⑵人参皂苷Rg1对LPS诱导的BV-2小胶质细胞 iNOS、COX-2、IL-1β及TNFα基因表达的抑制作用不能够被GR阻断剂RU486（1μM）阻断(P>0.05)。⑶ER阻断剂ICI182,780（1μM）能够阻断人参皂苷Rg1对LPS诱导的BV-2小胶质细胞iNOS、COX-2、IL-1β及TNFα基因表达的抑制作用（P<0.05）。⑷IGF-IR阻断剂JB-1（1μM）能够阻断人参皂苷Rg1对LPS诱导的BV-2小胶质细胞iNOS、COX-2、IL-1β及TNFα基因表达的抑制作用（P<0.05）。⑸RU486或JB-1能够阻断人参皂苷Rg1对LPS诱导的BV-2小胶质细胞炎性因子限速酶iNOS和COX-2蛋白表达的抑制作用；而ICI182,780可部分阻断Rg1的抑制作用。⑹LPS能够提高MAPKs（ERK，JNK，p38）信号通路蛋白的磷酸化水平，人参皂苷Rg1预保护能够对抗 LPS引起的蛋白磷酸化，此作用可以被 RU486、ICI182,780或JB-1所阻断（P<0.05）。⑺LPS能够提高NF-κB信号通路IκB蛋白的磷酸化水平，人参皂苷Rg1预保护能够对抗LPS引起的蛋白磷酸化，此作用亦可被 RU486或JB-1所阻断。而ICI182,780可部分阻断Rg1的抑制作用。

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引言

第一章 实验材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

第二章 实验结果

2.1 GR、ER以及IGF-IR在BV-2小胶质细胞上的表达

2.2 JB-1、ICI182,780对人参皂苷Rg1抑制炎症因子基因表达的影响

2.3 RU486对人参皂苷Rg1抑制炎症因子基因表达的影响

2.4 RU486、JB-1、ICI182,780对人参皂苷Rg1抑制炎症反应限速酶iNOS和COX-2蛋白表达的阻断作用

2.5 人参皂苷Rg1通过GR，IGF-IR以及ER抑制炎症相关信号通路蛋白磷酸化水平的变化

第三章 讨 论

结论

参考文献

附图

综述:人参皂苷Rg1通过抑制炎症反应防治神经退行性疾病的研究

附录

攻读学位期间发表的论文、参加的会议和参与的课题情况

致谢

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