血浆miR-137和miR-124与帕金森病及其非运动症状的关系

摘要

目的：
　　帕金森病（Parkinson’s disease,PD）除静止性震颤、肌强直等运动症状之外，还存在抑郁、认知功能障碍等非运动症状，这些非运动症状同样严重影响患者的生活质量。微小RNA（microRNAs,miRNAs）是一类内源性非编码小RNA分子，其在转录后水平调节基因表达。最近研究发现miR-137，miR-124和miR-184在中枢神经系统中高度表达，并且在神经元调节中起重要作用。本研究通过检测PD患者血浆中miR-137,miR-124和miR-184的表达水平，探讨了miR-124，miR-137和miR-184作为非侵入性生物标志物在PD诊断中的潜在作用并进一步分析这些miRNAs与PD及PD合并抑郁、PD合并认知功能障碍的关系。
　　方法:
　　选取青岛大学医学院附属医院60例PD患者和60例健康者作为研究对象，所有PD患者均进行统一帕金森病等级量表(unified Parkinson’s disease rating scale，UPDRS)评分，包括I（精神活动，行为和情感障碍）、Ⅱ（日常生活）、Ⅲ（运动功能）部分及Hoehn—Yahr分级，并应用汉密尔顿抑郁量表（HAMD-24)将PD患者分成抑郁亚组24例和非抑郁亚组36例；应用简易精神检查（Mini Mental Status Exam，MMSE）评分量表将PD患者分成痴呆亚组22例和非痴呆亚组38例。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）的方法检测血浆中miR-137，miR-124和miR-184表达水平并进行比较分析。绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC曲线)判断血浆miR-124及miR-137水平对PD的诊断价值。进行相关性分析，判断血浆miR-124及miR-137水平与PD患者的UPDRS日常生活能力、运动功能评分及Hoehn-Yahr分级有无相关性。分别比较PD抑郁亚组与PD非抑郁亚组、PD痴呆亚组与PD非痴呆亚组血浆miR-124及miR-137水平变化。
　　结果：
　　1.与对照组相比，帕金森病患者血浆miR-137表达上调，差异具有统计学意义（t=4.44, P＜0.05）；miR-124表达下调，差异具有统计学意义(t=-2.36, P＜0.05)；PD患者和对照组之间miR-184的水平没有显著性差异（t=1.52, p＞0.05）。
　　2. miR-137和miR-124的ROC曲线下面积分别为miR-137(AUC=0.70，95％CI=0.615-0.789，P＜0.05)，miR-124(AUC=0.709,95％CI=0.618-0.633，P＜0.05)，灵敏性和特异性分别为:miR-137为78.3％和56.7％，miR-124为66.7％和63.3％，血浆miR-137和miR-124表达水平对PD具有较高的诊断效能。
　　3.Pearson相关性分析显示PD患者血浆miR-124和miR-137水平与UPDRS日常生活能力、运动功能评分无相关性（P＞0.05），Spearman相关性分析显示PD患者血浆miR-124和miR-137水平与Hoehn-Yahr分级无相关性（P＞0.05）。
　　4.亚组分析结果显示：与PD非抑郁亚组相比，PD抑郁亚组血浆miR-137和miR-124水平无显著性差异（P＞0.05）。
　　5.与PD非痴呆亚组相比，PD痴呆亚组血浆miR-137和miR-124水平无显著性差异（P＞0.05）。
　　结论：
　　血浆miR-137和miR-124表达水平与PD发病相关，并且可能是PD诊断的潜在生物标志物。血浆miR-137和miR-124表达水平与PD伴发抑郁、认知功能障碍等非运动症状无相关性。

目录

引言

材料

1 研究对象与分组

2 实验仪器与设备

3 主要实验试剂

方法

1 实验标本收集

2 血浆总RNA的提取

3 RNA浓度及OD值测定

4 逆转录cDNA合成

5 实时荧光定量PCR

6 统计学分析

结果

1 研究人群一般临床特征

2 血浆miR-137和miR-124在PD患者的表达水平

3 血浆miR-137和miR-124对PD的诊断效能

4 血浆miR-137和miR-124水平与PD运动症状的关系

6 PD痴呆亚组和PD非痴呆亚组的血浆miR-137和miR-124的临床特征和血浆水平

讨论

结论

参考文献

综述：MiRNAs在神经退行性疾病中的研究进展

攻读学位期间的研究成果

附录

致谢

声明