血IL-6、8及MMP-9表达水平在宫内感染所致新生鼠肺损伤中的意义

摘要

目的：
　　采用腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）的方法构建稳定的宫内感染的孕鼠模型，通过肺组织病理切片了解宫内感染对肺部组织造成的损伤程度，监测新生鼠血中IL-6、IL-8、MMP9的浓度，探究前述炎症因子对预测肺部疾病的价值。
　　方法：
　　宫内感染组：孕18天的孕鼠18只，分别于宫腔内注射合适浓度的 LPS（0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mg/kg）。对照组：孕18天的孕鼠3只，于宫腔内注射和感染组LPS等量的灭菌生理盐水。查看自然分娩的新生大鼠存活数量，每只均擦干称重，再与分娩母鼠共同饲养，记录每天不同时刻新生大鼠的呼吸频率、动度以及有无发绀等异常情况；首先收集自然分娩后胎盘（自然分娩下收集胎盘容易失败，可选择择期剖宫产收集新鲜胎盘）；按照1、3、7日龄分别随机选取两组中自然分娩所得的每窝新生大鼠中的8只新生大鼠，每组每个时间点共48份肺组织标本。将随机选取的新生大鼠断头取血（心脏取血或眼球内眦取血），留取血标本用于ELISA实验；处死后迅速取出肺组织，将所取的胎盘与肺均进行HE染色制成切片备用。比较实验组与对照组中随着药物剂量递减孕鼠死亡率、流产率以及新生大鼠死亡率的变化，比较不同LPS组新生鼠胎盘及肺病理评分、新生鼠体重／肺重、ELISA法监测胎鼠血中的IL-6、IL-8、MMP-9表达差异有无统计学意义。
　　结果：
　　①注射LPS浓度大于0.7mg/kg时，各组胎盘病理与对照组相比较差异有统计学意义（P＜0.05），胎盘病理可见存在炎症细胞开始浸润绒毛膜羊膜，且注射孕鼠LPS浓度越高，炎症细胞愈多，浸润组织部位越多。
　　②通过注射不同浓度LPS造成肺部炎症浸润的程度也不相同，不同组炎症评分与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05），提示宫内感染可造成肺部炎症，当注射LPS浓度越高，肺部组织炎症细胞浸润越多，肺部组织破坏越多，新生大鼠肺部损伤越重，并且这种损伤会持续至生后7天左右。
　　③注射不同浓度LPS的新生大鼠每天呼吸情况及生长指标相比较，实验组与对照组新生大鼠呼吸频率与体重/肺重相比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　④与对照组比较，实验组新生鼠血中IL-6、IL-8、MMP-9的浓度差异有统计学意义（P＜0.05），并且随着注射LPS浓度的增高，新生鼠血IL-6、IL-8、MMP-9的浓度也越来越高。
　　结论：
　　SD大鼠孕18 d腹腔注射 LPS可导致孕鼠宫内感染，且在注射LPS浓度为0.7 mg/kg时，可制作稳定的宫内感染的模型，同时当注射LPS浓度大于或等于0.7 mg/kg时可造成新生鼠肺病理损害、肺水肿，且这种损害会持续至生后7天，血中的炎症因子IL-6、IL-8、MMP-9也会增高，这对研究预测宫内感染肺部疾病有着重要价值。

目录

中英文名词对照

引言

实验方法及材料

1实验材料

2实验方法

2.1建立宫内感染动物模型

2.2标本的采集（包括胎盘、鼠肺及新生鼠血标本）

2.3新生大鼠的肺重、体重、胎盘重量以及肺重／体重的检测

2.4肺组织的病理检查

2.5胎盘组织的病理检查

2.6 ELISA法检测新生大鼠血中炎症因子（IL-1、6、8、10，TNF-α ，及MMP-8、9，趋化因子CCL-3、4、20，MCP-2、3等）

3统计学方法

结果

1孕鼠流产率、新生鼠死亡率

2不同浓度LPS所致胎盘及新生鼠肺部病理评分

3不同浓度LPS所致新生鼠血中IL-6、IL-8、MMP-9的浓度

讨论

结论

参考文献

综述：血及肺组织中IL-8、MMP-9表达水平在宫内感染所致新生儿肺部疾病中的意义

攻读学位期间研究成果

致谢

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