强直性脊柱炎Andersson病局部韧带成纤维细胞成骨能力的研究

摘要

目的： 通过对强直性脊柱炎及腰椎间盘突出症患者棘上韧带组织成纤维细胞进行细胞培养观察其成骨分化能力，分别在培养基中加入强直性脊柱炎患者血清及正常人血清，进行对照实验，观察两种成纤维细胞分化成成骨细胞的能力，探究强直性脊柱炎患者成骨能力强大的原因。 方法： 实验所需标本分别来源于强直性脊柱炎Andersson病假关节处及棘上韧带组织（A成纤维细胞），腰椎间盘突出症患者棘上韧带组织（B成纤维细胞），强直性脊柱炎病人的血清和腰椎间盘突出症病人的血清（A血清、B血清）制作成两组培养基，将两组韧带成纤维细胞在不同血清培养基中培养，分为4个处理组即AA、AB、BA、BB，每日在相差显微镜中观察各组的成纤维细胞在培养过程中的具体演变，同时在培养之后的第20天，使用定量以及定性的检测方法来计算碱性磷酸酶活力参数，使用ELISA检测方法来计算骨钙素的具体表达参数，对比相关的成骨表达信息，评价四个组的成骨表达能力。 结果： 通过相差显微镜观察各组成纤维细胞培养情况，发现成纤维细胞分化形态具有相似的变化，各组碱性磷酸酶的活力以及骨钙素的表达状况，会伴随诱导时间的增加而提升，比较四个组成纤维细胞的成骨诱导及成骨标志物的表达情况，发现碱性磷酸酶活力及骨钙素表达量均为AA组＞AB组＞BA组＞BB组，四个组之间两两相比较具有统计学意义（P＜0.05）。 结论： 强直性脊柱炎以及腰椎间盘突出症病患的成纤维细胞在体外培养条件下存在着向成骨细胞分化的能力，同时强直性脊柱炎的成纤维细胞成骨趋势更为显著。在成纤维细胞分化过程中，强直性脊柱炎病患的血清促成骨分化效应相对更为突出，代表着AS病患的血清内有着含量更高的成骨诱导因子。通过比较AB组与BA组成骨表达程度，提出两个猜想：一是遗传条件下的成纤维细胞自身特性在成骨分化过程中发挥的成骨表达作用强于血清对成纤维细胞的促成骨作用，二是AS病患韧带局部存在比血清中含量更多的促成骨细胞因子。 意义： 通过对强直性脊柱炎成纤维细胞的体外培养，证实了成纤维细胞在强直性脊柱炎脊柱关节融合过程中发挥重要作用。成纤维细胞在体内大环境下，在成骨诱导因子的趋动下，强化成骨能力，致使脊柱关节融合。实验中AB组成骨强于BA组，由此提出两个猜想，强直性脊柱炎局部韧带成纤维细胞成骨能力的强大，究竟是成纤维细胞的本身属性还是局部韧带中存在更多的促成骨细胞因子在局部发挥关键作用，这值得去更进一步探索，可能会为强直性脊柱炎成骨机制的研究提供依据。

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