海洋生物JNY中抗肿瘤多肽分离纯化及其活性的初步研究

摘要

该实验对海洋生物JNY中的多肽组分进行了分离、纯化,并对其总多肽提取物和纯化产物分别进行了抗肿瘤活性的初步研究.经匀浆、盐析、离子交换柱层析、凝胶柱层析等步骤从海洋生物JNY中分离纯化得到两个纯化产物:JNY-1和JNY-2,经SDS-PAGE鉴定均为单一条带,在RP-HPLC上检测,其纯度均大于97％.测定其分子量分别为:16883.4Da和13189.7Da.经等电聚焦电泳鉴定均为单一条带,测定其等电点分别为5.3和5.7.该实验还测定了JNY-1和JNY-2的紫外吸收图谱及各自的氨基酸含量,通过苯酚-硫酸法初步判定JNY-1中含有多糖部分.药理学实验表明:JNY的总多肽提取物具有体内抗肿瘤活性,对接种S<,180>肿瘤小鼠的抑瘤率达到79.60％;纯化产物JNY-1和JNY-2具有体外抗肿瘤活性,对Glc-82肺腺癌细胞JNY-1的IC<,50>为23.33μg/ml;JNY-2的IC<,50>为9.59μg/ml.

目录

符号说明

第一章前言

1.1概述

1.2研究现状

1.2.1抗肿瘤、抗艾滋病多肽

1.2.2抗真菌多肽

1.2.3影响心脑血管系统的多肽

1.2.4作用于神经系统的多肽

1.2.5具有其它生物活性的多肽

1.2.6海洋肽类毒素

1.2.7展望

1.3立题依据

第二章JNY中多肽的分离纯化及其体内外抗肿瘤活性的初步测定

2.1实验材料

2.1.1实验原料及动物

2.1.2实验试剂

2.1.3实验仪器

2.2实验方法

2.2.1提取

2.2.2蛋白浓度测定

2.2.3抗肿瘤活性筛选

2.2.4纯化

2.3实验结果

2.3.1多肽浓度测定

2.3.2活性测定

2.3.3纯化条件的考察

第三章JNY中活性多肽的纯度鉴定和性质测定

3.1实验材料

3.1.1实验试剂

3.1.2实验仪器

3.2实验方法

3.2.1 SDS-PAGE

3.2.2等电聚焦电泳

3.2.3 RP-HPLC

3.2.4纯化产物的紫外吸收

3.2.5纯化产物的含糖性质测定

3.2.6纯化产物的氨基酸含量测定

3.3实验结果

3.3.1 SDS-PAGE

3.3.2等电聚焦电泳

3.3.3 RP-HPLC

3.3.4紫外吸收图谱

3.3.5纯化产物的含糖性质测定

3.3.6纯化产物的氨基酸含量测定

第四章结论与讨论

结论

讨论

4.1提取方法的选择

4.2纯化方案的选择

4.3 SDS-PAGE

4.4体外抗肿瘤活性测定

参考文献

附录

致谢