p53和NF-κB信号通路在MTB感染AECⅡ细胞中的免疫调控作用

摘要

肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡepithelial cells，AECⅡ)在抵抗肺脏感染结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）的过程中发挥着重要的免疫调控作用，但其具体的调控机制尚未阐明。NF-κB信号通路对病原菌（如MTB等）感染机体后引起的炎性反应起着重要的调控作用，p53信号通路参与了癌症和感染性等多种疾病的发生发展过程。那么MTB侵染AECⅡ时，p53与NF-κB信号通路是否参与调控机体的免疫反应来抵抗感染？本研究建立牛结核分枝杆菌减毒株（Bacillus Calmette-Guérin，BCG）作用p53和NF-κB基因过表达/干扰A549细胞的模型，利用RT-PCR、Western Blot以及炎症因子蛋白定量芯片技术分析p53和NF-κB信号通路相关信号分子与炎症因子的表达变化规律，以期发现p53与NF-κB信号通路在AECⅡ抗MTB感染的免疫应答过程的“cross-talk”关系。
　　通过试验分析发现:BCG作用于p53基因过表达的A549细胞促进了p53、p-MDM2、TNF-α和IL-8的表达，抑制了TLR-4、NF-κB、TRAF6、MDM2、CBP、IFN-γ和IL-6的表达;BCG作用于p53基因干扰的A549细胞抑制了p53、CBP和TRAF6的表达，促进了MDM2/p-MDM2、TLR-4、NF-κB、TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8的表达。BCG作用于NF-κB基因过表达的A549细胞抑制了p53和MDM2的表达，促进了NF-κB、TLR-4、TRAF6、p-MDM2、CBP、TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8的表达;BCG作用于NF-κB基因干扰的A549细胞促进了NF-κB、TLR-4、TRAF6、MDM2/p-MDM2、CBP和TNF-α的表达，抑制了p53、IFN-γ、IL-6和IL-8的表达。这些结果揭示了p53信号通路通过负调控NF-κB信号通路，控制细胞炎症反应来参与AECⅡ细胞的抗结核免疫调控作用。这为进一步研究AECⅡ中p53和NF-κB信号通路在抗结核先天免疫中的调控作用奠定理论基础。

目录

声明

摘要

中英文对照表

第一章文献综述

1．1结核分枝杆菌与结核病的发生

1．2肺泡Ⅱ型上皮细胞与结核分枝杆菌

1．3 p53信号通路及其研究进展

1．4 NF-κB信号通路及其研究进展

1．5 p53信号通路及NF-κB信号通路在抗结核感染中的免疫调控

1．6研究目的及意义

第二章MTB感染AEC Ⅱ时p53和NF-κB信号通路及炎症反应的变化

2．1实验材料

2．2实验方法

2．3结果与分析

2．4讨论

2．5小结

第三章过表达／干扰p53在MTB感染AEC Ⅱ时p53和NF-κB信号通路及炎症反应的变化

3．1实验材料

3．2实验方法

3．3结果与分析

3．4讨论

3．5小结

第四章过表达／干扰NF-κB在MTB感染AEC Ⅱ时p53和NF-κB信号通路及炎症反应的变化

4．1实验材料

4．2实验方法

4．3结果与分析

4．4讨论

4．5小结

第五章结论

参考文献

致谢

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