四种农药对枸杞木虱及其乙酰胆碱酯酶活性的影响

摘要

枸杞木虱Paratrioza sinsca Yang et Li是枸杞主要害虫之一，常造成枸杞大量减产，甚至无收。乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase AChE)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的靶标酶。因此，研究有机磷农药对枸杞木虱毒力作用，以及枸杞木虱AChE的生物化学性质对昆虫抗药性研究和新农药开发有很重要的意义。 采用浸渍法测定辛硫磷、三唑磷、功夫、高效氯氰菊酯对若虫期枸杞木虱毒力作用。有机磷农药对枸杞木虱若虫的致死中浓度(LC50)随着龄期的增加而升高，三唑磷对若虫作用效果好于辛硫磷。高效氯氰菊酯和功夫对若虫期枸杞木虱LC50。随着龄期增加升高。 正交实验测定比较枸杞木虱成虫和五龄若虫AChE最佳反应条件。依据最佳反应条件，采用经Gorun等改进Ellman的方法测定枸杞木虱各虫期乙酰酯酶的比活力。结果表明若虫期AChE比活力随着龄期升高而降低，一龄期若虫AChE的比活力最大(5.147±0.368nmol·min-1·mg-1)，四龄期若虫AChE的比活力最小(0.393±0.008nmol·min-1·mg-1)。 辛硫磷和三唑磷对若虫期AChE的抑制中浓度(IC50)随其乙酰酯酶比活力升高而降低，同一虫期，三唑磷对AChE的抑制中浓度低于辛硫磷，说明AChE对三哗磷更敏感。二龄若虫AChE的Km值最小(0.011±0.001mol/L)，其与底物亲和力最强。由AChE最大反应速率(Vm)值可知，AChE对底物水解效率顺序为:一龄＞二龄＞三龄＞五龄＞四龄。由AChE抑制时间进程曲线可知，四龄若虫AChE对辛硫磷敏感性较强，对三唑磷较弱，其他虫期木虱AChE对三唑磷和辛硫磷敏感性无差异。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1研究的目的和意义

1.2国内外研究进展

1.2.1昆虫AChE研究进展

1.2.2 AChE在抗药性中的作用

1.2.3有机磷农药毒理作用

2材料与方法

2.1供试虫源

2.2仪器设备和化学试剂

2.3枸杞木虱毒力测定

2.3.1枸杞木虱若虫毒力测定

2.3.2枸杞木虱成虫毒力测定

2.3.3供试药剂浓度设置

2.4 AChE生物化学性质测定

2.4.1 AChE酶液制备

2.4.2枸杞木虱AChE最佳反应体系正交实验设计

2.4.3枸杞木虱AChE最佳反应体系建立

2.4.4 AChE比活力测定

2.5 AChE动力学性质

2.5.1农药对各虫期枸杞木虱AChE体外抑制作用

2.5.2枸杞木虱AChE米氏常数及最大反应速率

2.5.3枸杞木虱AChE时间动力学曲线

2.6枸杞木虱蛋白质含量

2.6.1蛋白质标准曲线测定

2.6.2枸杞木虱蛋白质含量的测定

3结果与分析

3.1枸杞木虱毒力测定

3.1.1有机磷农药对枸杞木虱毒力作用

3.1.2拟除虫菊酯类杀虫剂对各虫期毒力作用

3.2枸杞木虱AChE最佳反应体系建立

3.2.1不同处理组合AChE比活力

3.2.2枸杞木虱五龄若虫和成虫AChE正交试验结果方差分析

3.2.3试验因素各水平间多重比较

3.3各虫期AChE 比活力比较

3.4 AChE动力学性质

3.4.1三唑磷和辛硫磷对各发育阶段枸杞木虱AChE体外抑制作用

3.4.2功夫和高效氯氰菊酯对不同龄期枸杞木虱AChE体外抑制作用

3.4.3各虫期枸杞木虱AChE米氏常数和最大反应速率

3.4.4各虫期枸杞木虱AChE的抑制时间动力学曲线

4结论与讨论

4.1有机磷和拟除虫菊酯类农药对枸杞木虱毒力作用

4.2 AChE的生物活性

4.3 AChE动力学性质

致谢

参考文献

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