沙地云杉体细胞胚胎发生组织细胞学及光学显微结构的研究

摘要

本研究以沙地云杉的成熟合子胚为外植体，诱导体细胞胚胎发生。对沙地云杉体细胞胚胎发生所涉及的各种影响因素，以及体细胞胚胎发生过程中的生理生化特性进行了研究。运用石蜡切片观察了体细胞胚胎发生过程中的显微结构和组织学的变化，同时研究了植物激素对体细胞胚胎发生的作用。测定SOD总酶活性以及愈伤重量的日增长率来确定最佳培养基以及其激素浓度配比，最终确定沙地云杉最佳的体细胞胚胎发生体系。从而为进一步了解沙地云杉组织培养胚胎发生的规律，以及建立沙地云杉组织培养高效再生体系提供理论依据。具体结论如下： 1.沙地云杉愈伤组织诱导过程中SH培养基诱导率明显比LM培养基高。 2.沙地云杉诱导愈伤培养基最佳组合:SH+2，4-D0.1mg·L-1+6-BA0.1mg·L-1。 3.沙地云杉增殖愈伤培养基最佳组合:SH+2,4-D1.5mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1+谷氨酰胺400mg·L-1。 4.愈伤组织增殖过程中SOD酶活性上升，使代谢加快，愈伤组织生长势增加。这个指标可以鉴定沙地云杉愈伤组织增长率。 5.通过对7种分化培养基SH、MS、1/2MS、DCR、B5、LS、Z的对比试验发现沙地云杉愈伤最佳分化培养基为：LS培养基。 6.沙地云杉愈伤组织分化培养基最佳组合:LS+ABA5.0mg·L-1+PEG400050.0g·L-1谷氨酰胺400mg·L-1+精氨酸50mg·L-1。 7.通过研究沙地云杉体细胞胚胎发生过程中的显微结构特征，观察结果表明：沙地云杉体细胞胚胎起源于胚性愈伤组织的单个细胞。体细胞胚胎的成熟过程大致可分为四个时期:球形胚时期、心形胚时期、鱼雷形胚时期，以及具有子叶的成熟胚时期。

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文摘

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论文说明：缩略语表

声明

1.引言

1.1植物体细胞胚胎发生的研究进展

1.2云杉属树种体细胞胚胎发生的研究进展

1.3影响云杉属树种体细胞胚胎发生的因素

1.3.1材料

1.3.2基本培养基

1.3.3植物激素

1.3.4PEG

1.3.5光照与温度

1.4植物体细胞胚胎发生的显微结构和组织细胞学观察

1.4.1植物体细胞胚胎发生的显微结构

1.4.2植物体细胞胚胎发生的组织细胞学观察

1.5云杉属树种体细胞胚胎发生的显微结构和组织细胞学观察

1.5.1云杉属树种体细胞胚胎发生的显微结构

1.5.2云杉属树种体细胞胚胎发生的组织细胞学观察

1.6云杉属树种体细胞胚胎发生的应用前景

1.6.1种质保存

1.6.2人工种子的制作

1.6.3原生质体培养

1.6.4基因转导

1.7研究目的和意义

2.材料和方法

2.1材料来源及其表面灭菌

2.1.1材料来源

2.1.2外植体处理

2.1.3培养条件

2.2愈伤组织的诱导、增殖与生长指标的测定方法

2.2.1愈伤组织的诱导

2.2.2愈伤组织的保持和增殖

2.2.3愈伤组织的诱导与生长指标的测定方法

2.3愈伤组织的分化

2.4石蜡切片

2.5数据处理方法

3.结果与分析

3.1沙地云杉愈伤组织诱导

3.1.1不同种类培养基对沙地云杉愈伤组织诱导的影响

3.1.2不同种类激素浓度对沙地云杉愈伤组织诱导的影响

3.2沙地云杉愈伤组织增殖

3.2.1不同种类激素浓度对沙地云杉愈伤组织增殖的影响

3.2.2不同种类激素浓度对沙地云杉愈伤组织中SOD酶活性的影响

3.3沙地云杉愈伤组织分化

3.3.1不同基本培养基对沙地云杉愈伤组织分化的影响

3.3.2 ABA与PEG4000的不同配比对沙地云杉愈伤组织分化的影响

3.3.3光照对沙地云杉愈伤组织分化的影响

3.4沙地云杉体细胞胚胎发生过程中的显微结构和组织细胞学观察

3.4.1沙地云杉体细胞胚胎发生过程中的显微结构观察

3.4.2沙地云杉体细胞胚胎发生过程中的组织细胞学观察

4.讨论

4.1基本培养基

4.2植物激素的选择

4.3指标选择

4.3.1称重法

4.3.2 SOD酶活性

4.4愈伤组织的分化

4.4.1 ABA

4.4.2 PEG

4.5体细胞胚胎发生过程中的显微结构和组织细胞学观察

5.结论

致谢

参考文献

图版

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