日本马铃薯新品系高效再生体系的建立

摘要

随着马铃薯新品种的出现以及在生产上的应用推广，由于基因型的差异，其脱毒快繁的培养体系及试管薯形成的条件有明显的差异。本论文以引进日本马铃薯新品系06-10为试验材料，对其节间培养及其增殖的条件进行了探讨，系统地研究了马铃薯高效再生体系建立和试管微型薯的诱导，建立起该日本马铃薯新品系的高效再生体系，对该马铃薯试管薯离体快繁的影响因素及调控机理进行了初步研究。在试验中成功获得了一批无菌苗，诱导出了试管微型薯，为今后的研究工作提供了材料和基础。试验结果表明： 1.启动培养时用0.1％HgCl27min+75％的乙醇15s体表灭菌对该马铃薯品种的嫩茎消毒处理效果最佳，其污染率为12.5％。且最佳诱导培养基为MS+0.5mg/LJAA+0.1mg/LKT，芽分纯成菌率最高达到了81.25％。 2.不定芽的增殖。以日本马铃薯品系06-10节间为外植体，探讨了不同激素及组合、不同蔗糖浓度处理等对其不定芽分化及增殖的影响。结果表明：（1）适宜的不定芽分化的单因子激素诱导培养基为MS+CPPU0.15mg/L、MS+6—BA1.5mg/L、MS+NAA0.1mg/L不定芽分化率分别达100％和94％，GA对不定芽的诱导呈现不规则的变化，且CPPU的作用强于6—BA、NAA、GA；（2）双因子激素组合比单一因素更有利于马铃薯试管苗的继代培养。马铃薯试管苗继代培养中低浓度NA（0.1mg/L）与适当浓度CPPU（0.15mg/L）配合使用、中高浓度GA（1.5mg/L）与适当浓度CPPU（0.15 mg/L）配合使用有利于苗的生长，能够改善苗的综合素质；（3）蔗糖浓度为30g/L对试管苗的培养效果最佳；适当浓度的CPPU、NAA、GA组合，对马铃薯试管苗继代增殖培养效果显著；适当的CCC浓度（200mg/L）可以增加茎粗，对缩短试管苗的节间距效果显著。 3.试管微型薯的诱导。（1）不同外源激素组合诱导试管薯的效果不同，结果表明：以激素组合NAA+ CPPU+ GA对试管微型薯的诱导效果最好；400 mg/L CCC+CPPU0.15mg/L处理促进了日本马铃薯品种06-10提早结薯，使单瓶试管薯数量、结薯率均有显著增加；（2）8％蔗糖有利于诱导试管薯的诱导；（3）光照8h培养对马铃薯试管薯的诱导效果最佳。 4.不定根的诱导。本试验研究了不同浓度的CPPU、6—BA、GA、NAA及组合配比对不定根形成的影响。结果表明:（1）根系最适宜的单因子激素诱导培养基为MS+NAA1.0mg/L，生根率达100％；（2）多因子激素诱导试管苗生根效果明显好于单因子的，平均生根率高达92.19％；添加了适当浓度的IBA后对马铃薯试管茁生根效果显著，处理MS+IBA0.5mg/L+CPPU0.1mg/L+NAA1.0mg/L+GA1.0mg/L诱导不定根分化效果最好，最佳培养时间为10～40d。 5.试管苗移栽。用蛭石移栽的试管苗存活率达到了93.50％。效果较好。

目录

文摘

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论文说明：图表目录、缩略语表

声明

1 引言

1.1马铃薯概述

1.2 国内外马铃薯组织培养研究动态及主要成果

1.2.1我国研究现状

1.2.2 国外的研究现状

1.3马铃薯再生的研究进展

1.3.1外植体的选择

1.3.2再生途径

1.3.3影响马铃薯再生体系建立的因素

1.3.4我国马铃薯组织培养研究需要解决的问题

1.4本试验研究的目的和意义

2材料与方法

2.1试验材料

2.2试验方法

2.2.1无菌环境的准备

2.3结果观察与统计方法

2.4试验设计

2.4.1启动培养(无菌体系的建立)

2.4.2继代增殖试验

2.4.3试管微型薯诱导试验

2.4.4试管苗生根壮苗试验

2.4.5试管苗移栽试验

3结果与分析

3.1启动培养(无菌体系的建立)

3.2继代增殖培养中植物生长调节剂的试验结果与分析

3.2.1单一激素试验结果与分析

3.2.2不同浓度双因子激素试验对苗继代增殖培养的效果

3.2.3不同浓度多因子激素试验对苗继代培养的效果

3.3试管薯诱导试验

3.3.1细胞分裂素、生长素和赤霉素及互作对试管薯诱导的影响

3.3.2细胞分裂素与矮壮素互作对试管薯诱导的影响

3.3.3不同浓度蔗糖对试管薯诱导的影响效果

3.3.4不同光照条件对试管薯诱导的影响

3.4不定根的诱导

3.4.1单一激素对马铃薯组培苗不定根诱导的影响

3.4.2不同激素配比对马铃薯试管苗不定根诱导的影响

3.4.3不同浓度IBA对马铃薯试管苗生根壮苗影响

3.5试管苗移栽

4结论与讨论

4.1启动培养

4.2马铃薯组培苗继代增殖

4.2.1不同激素对马铃薯组培苗继代增殖的影响

4.2.2蔗糖浓度对组培苗继代增殖的影响

4.3马铃薯试管微型薯的诱导

4.3.1外源激素对试管薯形成和发育的影响

4.3.2蔗糖对马铃薯试管微型薯诱导的影响

4.3.3光照条件对马铃薯试管微型薯诱导的影响

4.4马铃薯组培苗生根处理

4.5马铃薯的移栽

致 谢

参考文献

附 图

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