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BABA、MeJA及BTH诱导向日葵抗菌核病的研究&马铃薯NPR1基因的克隆及其表达载体构建

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1 前言

1.1 植物免疫反应

1.2 系统获得抗性

1.3 向日葵和马铃薯病害

1.4 本研究的目的和意义

2 实验一 BABA诱导下向日葵抗菌核病的研究

2.1 实验材料与方法

2.2 结果与分析

2.3 讨论

3 实验二 MeJA及BTH诱导下向日葵抗菌核病的研究

3.1 实验材料与方法

3.2 结果与分析

3.3 讨论

4 实验三 马铃薯NPR1基因的克隆及其表达载体构建

4.1 实验材料与方法

4.2 结果与分析

4.3 讨论

5 结论

致谢

参考文献

作 者 简 介

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摘要

向日葵(Helianthus annuus L)是世界上重要的油料作物之一,菌核病(Sclerotinia sclerotiorum)是向日葵生产中最严重的病害之一。目前生产中还未发现能完全抵抗菌核病的向日葵抗性材料,也缺乏安全有效的防治措施。利用诱导剂使植物产生诱导抗性是一种有效的抵抗病菌侵染的手段。鉴于此,本试验用β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)、甲基茉莉酸(Methyljasmonate,MeJA)、苯丙噻重氮(1,2,3-Benzothiadiazole-7-carbothioic acid S-methyl ester,BTH)处理向日葵,检测几种重要的防御酶的活性变化,发现经上述三种物质诱导后,苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase, PAL)、多酚氧化酶(Polyphenol, PPO)、过氧化物酶(Peroxidase, POD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性均比未处理的对照高;将离体叶片接种核盘菌后,菌斑面积显著降低,说明上述三种物质均可诱导向日葵对核盘菌的抗性。这对进一步研究向日葵诱导抗性机制及生产中的实际应用奠定了基础。
  马铃薯(Solanum tuberosum L)是世界第四大粮食作物,其种植面积和产量仅次于小麦、水稻和玉米,生产中马铃薯的病害一直非常严重。系统获得抗性(systemic aquired resistance,SAR)是指当植物局部受病原菌侵染后,可诱导植株远端未侵染部位产生对后续多种病原菌侵染表现出的抗性,是一种广谱而持久的抗性。NPR1(non-expressor of pathogenesis-related gene1)是植物水杨酸(Salicylate,SA)介导的SAR中关键的调控因子,它做为一种转录共激活因子起作用,可使多个PR(pathogenesis related gene,PR gene)基因诱导表达,产生抗病性。本试验从马铃薯中克隆了NPR1的cDNA序列和其启动子序列,并构建了由自身启动子驱动的NPR1表达载体,并成功转化农杆菌,为接下来研究NPR1在马铃薯抗病防御反应中的功能奠定了基础。

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