产ESBLs大肠埃希菌的耐药性及同源性分析

摘要

目的:通过对我院24株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和62株非产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性分析，并对24株产ESBLs大肠埃希菌进行同源性分析，了解我院产ESBLs大肠埃希菌的检出率和耐药性，为临床合理使用抗生素和控制院内感染提供依据。
　　方法:收集我院临床科室分离的86株大肠埃希菌，应用VITEK2微生物自动分析仪进行鉴定及药敏试验，同时采用NCCLS推荐的纸片扩散表型确证法检测ESBLs酶。提取细菌基因组DNA，采用rep-PCR法对24株产ESBLs大肠埃希菌进行同源性鉴定。
　　结果:药敏结果显示产ESBLs菌株对临床常用的12种抗菌药物耐药率远高于非产ESBLs菌株，产ESBLs菌株对头孢菌素类抗生素耐药率超过了80％，对氨基糖苷类、磺胺类、喹诺酮类抗生素耐药率均很高，呈现多重耐药及高耐药率的特点，24株产ESBLs大肠埃希菌用rep-PCR分型共分为20种基因型。
　　结论:产ESBLs大肠埃希菌具有多重耐药及高耐药率的特点，无克隆株的流行，但存在一定的交叉感染，实验室应加强对产ESBLs菌株的检测，指导临床合理使用抗生素，实施有效的措施控制ESBLs菌株的扩散，防止院内感染的暴发流行。

目录

声明

摘要

缩略词表

第一章 引言

1．1 大肠埃希菌的病原学特点及致病性

1．1．1 大肠埃希菌的致病性

1．1．2 大肠埃希菌的病原学特点

1．2 产ESBLs大肠埃希菌耐药机制

1．2．1 产ESBLs大肠埃希菌生物化学耐药机制

1．3 ESBLs的检测方法

1．3．1 表型确证实验

1．3．2 三维试验

1．3．3 仪器法

1．3．4 蛋白质分析

1．3．5 基因检测

1．4 ESBLs的分类、分布及特性

1．4．1 TEM酶

1．4．2 SHV酶

1．4．3 CTX-M酶

1．4．4 OXA酶

1．4．5 其它ESBLs

1．5 产ESBLs大肠埃希菌易感因素

1．6 产ESBLs大肠埃希菌防控措施

1．6．1 加强对ESBLs的实验室检测

1．6．2 加强对病房的管理：针对感染产ESBLs大肠埃希菌的患者应采取以下措施

1．6．3．针对高危人群应严格监控环境，减少有创治疗，加强支持疗法，提高患者免疫力

1．6．4 合理使用抗菌药物

1．6．5．加强药政管理

1．7 本文研究目的和意义

第二章 产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析

2．1 材料

2．1．1 临床资料

2．1．2 质控菌株

2．1．3 主要药品与试剂

2．1．4 主要仪器

2．2 方法

1．2．1 菌种的分离及培养

2．2．2 鉴定的基本操作过程

2．2．3 ESBLs的检测

2．3 统计学处理

2．4 结果

2．4．1 产ESBLs大肠埃希菌的感染现状

2．4．2 大肠埃希菌的耐药情况

2．5 讨论

第三章 产ESBLs大肠埃希菌的同源性分析

3．1 实验材料

3．1．1 临床资料

3．1．2 主要试剂

3．1．3 主要仪器

3．2 试验方法

3．2．1 细菌的培养

3．2．2 LB培养基的制备

3．2．3 菌液的制备

3．2．4 DNA提取

3．2．5 PCR扩增

3．2．6 PCR产物检测

3．3 聚类分析

3．4 结果

3．4．1 细菌基因组的提取结果

3．4．2 PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳结果

3．4．3 聚类分析结果

3．5 讨论

结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的论文