低剂量奶牛性控冷冻精液生产新技术产品试制与示范应用

摘要

流式细胞仪分离精子的人工授精是目前控制哺乳动物出生后代性别最为可靠的繁育生物技术。但受专利和生产成本的限制，以奶牛为主的性控冷冻精液的高成本制约其广泛推广应用，因此提高奶牛性控冷冻精液精液的生产效率是当前降低产品成本的有效途径。本研究通过研制一种混合异种动物精液的新型奶牛性控冷冻精液生产技术，达到提高奶牛性控冷冻精液精生产效率、降低其生产成本并且可以进行产业化推广应用的目的。
　　本实验对比了3种剂型混合异种动物精液的奶牛混合性控冷冻精液冻后活力、存活时间、顶体完整率检测结果及成年母牛人工授精效果。首先以低剂量（100万/0.25ml）奶牛分离X精子为性控冷冻精液产品目的精子，在分离X精液中添加不同浓度山羊精液，制备3个剂型的混合奶牛性控冷冻精液X1型、X2型、X3型（X1型含山羊精子300万个/0.25ml，X2型含山羊精子600万个/0.25ml，X3型含山羊精子900万个/0.25ml）。然后对3个剂型冻精活力、存活时间、顶体完整率进行评定，来探讨混合奶牛冷冻精液中不同浓度山羊精液对奶牛性控冷冻精液品质以及人工授精的受胎率影响。实验结果表明:X1型奶牛性控冷冻精液存活时间显著高于X2型和X3型产品(8 vs6 vs5)P＜0.05; X1型奶牛性控冷冻精液活力较X2型和X3型有所提高(55％ vs52％ vs48％)，但相互之间差异不显著P＞0.05; X1型奶牛性控冷冻精液与X2型、X3型冻精的顶体完整率差异不显著(54％ vs52.7％ vs51.9％)P＞0.05。但是，X1型奶牛性控冷冻精液进行人工授精90天后的受胎率显著高于X2型和X3冻精产品(51.9％vs33.6％vs29.9％)P＜0.05。根据上述实验结果提出本研究结论:浓度为300万/0.25ml的山羊精液混合100万/0.25ml的分离奶牛X精液制备的混合奶牛性控冷冻精液新技术产品，使生产效率提高2倍相对生产成本降低50％，冻精质量指标及人工授精的受胎率结果均达到常规性控冷冻精液的水平，证明该混合奶牛性控冷冻精液可以产业化生产并且进行产业化推广应用。

目录

声明

摘要

缩略词表

第一章 文献综述

1．1、哺乳动物性别控制技术

1．2、哺乳动物精子分离技术

1．3、性控技术的商业化推广概况

1．4、奶牛性控冷冻精液的推广应用

1．5、低剂量奶牛性控冻精的研究现状

1．6、奶牛精子中添加异种动物精液制备混合冷冻精液的研究现状

1．7、研究目的与意义

第二章 材料与方法

2．1、实验材料

2．2、鲜精采集、保存和运输

2．3、原精预处理

2．4、牛原精染色

2．5、牛精子分离

2．6、分离牛精子的平衡

2．7、山羊精液的配制

2．8、低剂量混合冷冻精液新技术产品制作

2．9、装管冷冻保存

2．10、低剂量新技术产品质量评估

2．11、人工授精

2．12、数据统计

第三章 结果

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

致谢